芳酸类非甾体抗炎药物分析2014.PPT

第二节 鉴别试验 鉴 别 反 应 与铁盐反应 重氮化-偶合反应 氧化反应 水解反应 UV IR TLC HPLC 一、与铁盐反应 二、重氮化－偶合反应 1、对氨基酚及有关物质 乙酰化不完全或贮藏不当引起水解－毒性较大并有色泽 第四节 含量测定 USP29方法：取本品约1.5g，精密称定，精密加入NaOH滴定液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4 Ch.P. 阿司匹林片 例：称取10片重 1.8240g 苯甲酸钠的测定 有机酸碱金属盐类的常用测定方法，在水和与水不相混溶的有机溶剂（乙醚）中用标准酸进行滴定。 苯甲酸钠易溶于水，水溶液呈碱性，可用酸滴定 滴定过程析出的苯甲酸微溶于水，使溶液浑浊，与苯甲酸钠构成缓冲对使终点pH突跃不明显，干扰终点的正确判断。 因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法 直接紫外分光光度法 柱分配色谱-紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在257nm波长处有最大吸收，中国药典采用百分吸收系数（ ）法，测定对乙酰氨基酚的含量。 例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂 柱分配色谱-紫外分光光度法 水杨酸的限量测定 思考题 对乙酰氨基酚 特殊杂质：中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯苯乙酰胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等） 对氨基酚的检查 二、对乙酰氨基酚中的特殊杂质 （一）合成工艺 检查方法： 高效液相色谱法。 注：对氨基酚对照溶液不稳定，应临用前新鲜配制。 二、对乙酰氨基酚中的特殊杂质 2、对氯苯乙酰胺 以对氯苯乙酰胺为对照品，HPLC限度检查。 （二）检查 （一）合成工艺 邻-氯苯甲酸 2，3-二甲基苯胺 甲芬那酸 三、甲芬那酸中特殊杂质的检查 （二）检查—2,3-二甲基苯胺的检查 方法：高效液相色谱法 + 偶合 Cu 乙酰化 (CH3CO)2O,AlCl3 氧化 H2O2 水解 OH-/H+ 羧化 CO2,CH3ONa （一）合成工艺 四、二氟尼柳中特殊杂质的检查 （二）检查 正相TLC检查有关物质A： 供试品溶液：本品+甲醇→10mg/ml 对照溶液：50μg/ml甲醇溶液 方法：照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-二氧六环-冰醋酸(85:10:5)为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 反相HPLC检查有关物质B 供试品溶液与对照溶液：有关物质A项 色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-甲醇-乙腈-冰醋酸(55:23:30:2)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按二氟尼柳峰计算不低于2000。 精密量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％～25％ 精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍 供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积。 酸碱滴定法（以阿司匹林为例） 双相滴定法(以苯甲酸钠为例) 紫外分光光度法(以对乙酰氨基酚为例) HPLC法(阿司匹林栓剂) （以阿司匹林为例） 直接滴定法 水解后剩余滴定法（USP） 两步滴定法 一、酸碱滴定法 溶剂：中性乙醇 乙醇：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定过程水解 中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，可消除滴定误差 指示剂：酚酞 用NaOH标准溶液直接滴定。 直接滴定法 原理 ChP用于阿司匹林原料药的测定 优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸） 适用条件：不能用于含水杨酸过高或制剂分析， 只能用于合格原料药的含量测定 应用范围：水杨酸、双水杨酯、丙磺舒、布洛芬等 直接滴定法 ——利用阿司匹林分子中的酯键，先加过量定量的NaOH溶液使之水解，然后用H2SO4滴定剩余的NaOH，同时做空白。 水解后剩余滴定法（USP） 过量定量 原理 水解后剩余滴定法（USP） 水解后剩余滴定法（USP） 计算公式 特点 优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰 ChP用于阿司匹林片剂的含量测定 两步滴定法 阿司匹林片剂中加稳定剂：酒石酸、枸橼酸 制剂过程产生水解产物 ：水杨酸、醋酸 消耗NaOH 测定结果偏高 采用两步滴定法测定片剂中阿司匹林含量 第2步——水解与测定，采用剩余