Bt杀虫晶体蛋白基因及其转基因育种研究进展3.PDF

《生物工程进展》2000 ,Vol . 20 ,No . 2 Bt 杀虫晶体蛋白基因及其转基因育种研究进展 吴 　刚　崔海瑞 　舒庆尧 　夏英武 (浙江大学原子核农业科学研究所 ,杭州 　3 10029) 摘要 　本文简要介绍了Bt 杀虫晶体蛋白及其编码基因 , 以及 目前通过基因工程方法获得的转 Bt 杀虫晶体蛋白基因植物 ,着重分析和探讨了目前转 Bt 杀虫晶体蛋白基因植物及转基因育种研究中 存在的一些问题 ,并就这些问题及合理持续利用 Bt 杀虫晶体蛋白提出了一些见解 。 关键词 　Bt 杀虫晶体蛋白　Bt 杀虫晶体蛋白基因　转基因育种 　 　Bt 基 因 是 苏 云 金 芽 孢 杆 菌 ( B acil l us 1. 2 　Bt 杀虫晶体蛋白结构和功能 t h u ri ng iens is ,Bt ) 晶体蛋白基因的简称 。由于 Bt 在 至 1997 年 ,全世界总共已发表了 100 多个 Bt 杀 芽孢形成时产生的晶体蛋白具杀虫活性 ,故称其为 虫晶体蛋白基因序列 ,其中 60 个为氨基酸序列同源 ( ) [5 ] “杀虫晶体蛋白 insecticidal cryst al p roteins , ICPs ” 性小于 96 %的晶体蛋白 。大部分杀虫晶体蛋白基 δ (δ ) [ 1 ] 或“内毒素 endotoxin ” 。 因各编码含一个 60kD 左右的胰蛋白酶抗性中心 ,分 1981 年 ,Schnepf 等人首次成功地克隆了一个 子量在 130 - 140kD 的蛋白。晶体蛋白中杀虫活性部 编码 Bt 杀虫晶体蛋白基因[2 ] ,揭开了利用基因工程 分位于晶体蛋白N 末端的胰蛋白酶抗性中心 ,而 C 培育抗虫植物 的序幕 。迄今为止 , 已分离测定了 末端对于维持蛋白的晶状结构具有非常重要的作用 。 100 多个杀虫晶体蛋白基因序列 。经过密码子优化 随着对 Bt 杀虫晶体蛋白空间结构研究的进一步深 的Bt 基因已被成功地导入烟草 、玉米 、棉花等多种 入 ,人们对该蛋白不同结构域的功能开展了广泛的研 植物 ,获得了一大批具 良好抗虫性的转基因植物品 究。研究表明:Bt 晶体蛋自由3 个不同区域组成 , Ⅰ区 α [6 ] 种和种质资源 ,产生了显著的社会经济效益 。目前 的 螺旋结构与微孔形成有关 , Ⅱ区顶端环状结构 Bt 基因已成为植物基因工程及转基因育种中应用 在蛋白与受体分子结合过程中有重要作用 ,而对 Ⅲ区 最广泛 ,最具潜力和应用前景的抗虫基因。 功能目前则了解较少[7 ] ,有人推测其在稳定 ICPs 整 体结构[8 ] ,决定 ICPs 专一性[9 ] ,形成离子通道[ 10 ] 及 1 　Bt 杀虫晶体蛋白及其编码基因 与中肠上皮细胞结合过程有关[ 11] 。对 ICPs 结构与 1. 1 　Bt 杀虫晶体蛋白基因的分类 功能关系的深入了解有助于设计具新杀虫活性的Bt 起初 ,Hfte 等[3 ] 根据Bt 晶体蛋白的寄主范围 , 杀虫晶体蛋白。 把它们分为 4 大类 14 个族 , 即 Cryl (鳞翅 目昆虫专 2 　转 Bt 基因植物及转基因育种 ) ( ) 一性