双二酮酸结构HIV-1整合酶抑制剂的合成及活性研究-中国医药生物技术.PDF

中国医药生物技术 2015 年10 月第10 卷第5 期 Chin Med Biotechnol, October 2015, Vol. 10, No. 5 411 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.05.005 ·论著· 双二酮酸结构HIV-1 整合酶抑制剂的 合成及活性研究 * * 翀 武燕彬 ，金洁 ，王瑞贞，刘浚，王 ，陈晓芳 【摘要】 想靶点，继续发现临床应用的整合酶抑制剂令人 目的 设计合成双二酮酸类化合物，并探讨此类化合物抑制 期待[2] 。 HIV-1 整合酶活性的构效关系。 对整合酶的结构研究以及与抑制剂相互作用 方法 以甲基取代苯乙酮为起始原料，经溴代后与羟基取代 方式的研究表明，在整合酶单体催化中心结构中含 苯乙酮反应生成乙酰基苄氧苯乙酮，然后在氢化钠作用下， 有一个环状区域（图 1 ），此区域中一个或两个二 脱去 α 氢后进攻草酸二乙酯生成双二酮酸酯，水解脱去酯 价金属离子与 D64 、D116 、E152 3 个残基键合， 基生成双二酮酸；经 1H-NMR 、IR 和 MS 验证化合物结 催化中心域残基 152-159 是 4- 螺旋结构，为 构。ELISA 法测定目标化合物对 HIV-1 整合酶的抑制活 HIV-1 的 DNA 键合位；140-152 是 loop 弹性环 性；采用高通量荧光法测定目标化合物对 HIV-1 整合酶 3 结构[3-4] ，是宿主 DNA 的结合位置。一个可信的 加工过程的抑制活性；测定目标化合物对 HIV 假病毒的细 理论是 3P 抑制剂键合在 HIV-1 的 DNA 键合 胞活性。 位，而 ST 抑制剂占据宿主 DNA 的位置。 结果 合成了 6 个全新结构的二酮酸类化合物；体外整合 酶活性评价结果表明，6 个目标化合物对 HIV-1 整合酶的 活性 IC50 ≤ 20 μg/ml ，双二酮酸之间距离稍短的 5a 、5c、 5d 对 3 加工过程有一定的活性，IC50 约为 40 μg/ml 。 结论 6 个新化合物对 HIV-1 的活性主要表现在链转移过 程。 【关键词】HIV 整合酶抑制剂； 构效关系； 双二酮 酸类化合物 中国医药生物技术, 2015, 10(5):411-415 逆转录酶、蛋白酶和整合酶是人免疫缺陷病 毒-1 （HIV-1 ）复制和感染所必需的酶。迄今已 图 1 整合酶中心域的计算机模拟图 有 15 个逆转录酶抑制剂、10 个蛋白酶抑制剂和 Figure 1 Simulation chart of HIV-1 integrase catalytic 3 个整合酶抑制剂通过了美国 FDA 审批用于治 domain 疗 HIV 感染，并且大多采用联合用药的方式[1] 。 其中整合酶抑制剂发展最晚，目前只有 3 个品种 双二酮酸类化合物有两个二酮酸官能团，对其 上市。 进行计算机模拟键合发现，最可能与整合酶结合 整合酶在病毒复制周期中催化逆转录病毒 DNA 整合到宿主染色体的过程，分两步完成：① 病毒 RNA 在整合酶催化下逆转录生成的双链 基金项目：科技部国际科技合作项目 （2009DFA31140 ） 作者单位：100050 北京，中国医学科学院北京协和医学院医药生物技 DNA ，其 3 端的两个核苷酸被切除，称为“3 加 术研究所有机化学室（武燕彬、金洁、刘浚、陈晓芳）；25508