第三章 蛋白质通性、纯化与表征.pptVIP

第3章 蛋白质的分离纯化和表征 ;一.蛋白质的酸碱性质 各个解离基团的pK值与游离氨基酸的不完全相同。短肽的等电点和净电荷量可以根据pK值计算，蛋白质的等电点要用等电聚焦等方法测定。 二.蛋白质分子的大小与形状 （一）根据化学组成测定最低相对分子质量 假定某种微量成分只有一个，测出其百分含量后，可用比例式算出最低相对分子质量。 若测出两种微量成分的百分含量，分别用比例式算出的最低相对分子质量不相同时，可计算两个最低相对分子质量近似的最小公倍数。 ; 例题：一种纯酶含亮氨酸（Mr 131）1.65%，含异亮氨酸（Mr131）2.48%，求最低相对分子质量。 解：按照Leu的百分含量计算，最低Mr X1： X1=(100 ? 131)/1.65=7939.4 按照Ile的百分含量计算最低Mr X2： X2=(100 ? 131)/2.48=5282.3 由于X1和X2数字差异较大，提示这种酶含Leu和Ile不止1个，为了估算Leu和Ile的个数，首先计算： X1/ X2=7939.4/5282.3≈1.5 这种酶含任何氨基酸的个数均应是整数，说明该酶至少含有2个Leu，3个Ile，其最低相对分子质量为： 7939.4 ? 2 =15878.8 或 5282.3×3=1584