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1株絮凝剂高产菌筛选及其培养条件优化摘要：从污水中筛选到１株新型高效微生物絮凝剂产生菌Ｎ－７， 根据其形态特征、生理生化特性初步鉴定为杆菌。该菌培养３２ ｈ进入稳定期，３６ ｈ时絮凝活性达到最大。通过单因素试验和正交试验表明，菌株Ｎ－７最适培养基为初始ｐＨ ７．５、培养温度３０ ℃、转速１７０ ｒ／ｍｉｎ，在此条件下，所产絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率高达 ９１．３％。 关键词：菌株筛选；微生物絮凝剂；正交试验；优化 中图分类号：Ｘ７０３．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）17－3715-04 Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ a Ｈｉｇｈ Ｆｌｏｃｃｕｌａｎｔｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｂａｃｔｅｒｉａ Stain ａｎｄ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ＷＡＮＧ Ｓｈｕｏ１，ＺＨＡＯ Ｙｉ－ｌｉｎｇ２，ＨＵＡＮＧ Ｄｅ－ｚｈｉ１，ＺＨＡＮＧ Ｃａｎ１，ＸＵＥ Ｙｏｎｇ－ｃｈａｎｇ１ （１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｄａｌｉａｎ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｄａｌｉａｎ １１６０３４，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ｈｕａｙｉｎｇ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Ｍａｔｅｒｉａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１００３４，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａ ｎｅｗ ｈｉｇｈ ｆｌｏｃｃｕｌａｎｔｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ strain Ｎ－７ ｗａｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｗａｓｔｅｗａｔｅｒ． Ｉｔ ｗａｓ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ ａ ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｉｔｓ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ and ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ． Ｔｈｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ｒｅａｃｈｅｄ ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ ｐｈａｓｅ ａｆｔｅｒ been cultured for ３２ ｈ， ａｎｄ ｈａｄ the ｍａｘｉｍｕｍ flｏｃｃｕｌａｔｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｆｔｅｒ ３６ ｈ． According to ｓｉｎｇｌｅ－ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ， ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｆｌｏｃｃｕｌａｎｔｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｉｎｉｔｉａｌ ｐＨ ７．５， ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ３０ ℃， ｒｏｔａｔｉｏｎ ｓｐｅｅｄ １７０ ｒ／ｍｉｎ. Tｈｅ ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ Ｋａｏｌｉｎ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ｒｅａｃｈｅｄ to ９１．３％ under the optimized conditions． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： strain ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ； ｂｉｏｆｌｏｃｃｕｌａｎｔ； ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ； ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ 絮凝剂是一种可使液体中不易沉降的固体悬浮颗粒凝聚沉降的物质。传统的絮凝剂按照其化学成分可分为无机絮凝剂和有机絮凝剂两类。其中无机絮凝剂是指利用铁、铝等金属离子沉降液体中不易沉降的固体悬浮颗粒，有机絮凝剂主要是指聚丙烯酰胺等一些具有高絮凝性的有机试剂［１－３］。传统的絮凝剂由于成本低而被广泛应用，但传统的絮凝剂存在二次污染现象，对人类身体健康和自然环境有潜在危害。因此，开发高效、无毒、无二次污染的新型絮凝剂具有重要的意义［４］。 微生物絮凝剂是一类由微生物或其分泌物产生的代谢产物，其絮凝范围广、絮凝活性高，作用条件粗放，可以广泛应用于污水和工农业废水处理中。由于其具有高效、安全、不污染环境的优点，在医药、食品加工、生物产品分离等领域也有巨大的潜在应用价值［５－10］。由于微生物絮凝剂可以克服传统絮凝剂的缺陷，最终实现无污染排放，因此微生物絮凝剂的研究正成为当今世界絮凝剂方面研究的重要课题。此前，国内外学者分离筛选出的产微生物絮凝剂的菌株有几十种。国外对于微生物絮凝剂的应用部分已处于工业化，由于微生物絮凝剂成本较高、絮凝活性低，目前我国尚未广泛应用于工业化生产中，本试验从污水中筛选得到１株具有高效絮凝作用的菌株，通过对其絮凝条件的优化，以期为工业化应用奠定理论基础。 １ 材料与方法 １．１ 材料 １．１．１ 菌株来源 试验菌株分离自沈阳仙女河污水处理厂以及沈阳西部污水处理中心收集的污水样品。 １．１．２ 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基、高氏１号培养基、麦芽汁培养基、查氏培养基、ＰＤＡ培养基。 １．１．３ 菌株分离 将污水充分振荡后，吸取１ ｍＬ悬浊液，加入到装有５０ ｍＬ培养基的三角瓶中，１６０ ｒ／ｍｉ