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ABO及血型鉴定影响因素及实验观察
ABO及血型鉴定影响因素及实验观察【中图分类号】R457.1【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2012)07-0114-01
血型鉴定是临床上常见的检查项目,血型鉴定正确与否,直接影响临床输血抢救组织血源工作,临床检验血型最常用的是玻片法,根据我们近五年来得出统计,有2例血型检查判定结果出现错误,均经临床输血前复查血型时发现。其中一例为B型血定位AB型,抽取该患者静脉血经抗凝后,发现自然形成细颗粒状凝集。鉴于上述情况,我们对血型检查影响因素及质量管理做了综合分析和试验探讨,现将全文分述如下:
1血型鉴定影响因素分析
影响血型鉴定主要有以下几个方面:
1.1责任性错误:在临床试验工作中,发生了严重输血反应,绝大多数是由于粗心大意、责任心不强造成血型鉴定错误。
1.2标准血清效价太低、亲和力不强、血清效价不符合标准。如抗A型误为O型,A型误为B型。
1.3红细胞悬液过浓或过淡,因为抗原抗体比例适当时,反应最明显。如红细胞悬液过浓,标准血清中的抗体全部被吸收,呈后带现象而不明显凝集或不凝集;红细胞悬液太淡,抗体浓度相对太高呈前带现象而不易凝集或凝集很弱、未被发现。
1.4红细胞串钱状形成(假凝集)。试验中温度过高或过低,时间太长水分蒸发,血清浓缩容易出现串钱状现象,某些肝肾疾病,传染或凡是红细胞沉降速度增快的病人,血中纤维蛋白原或蛋白增高或因输代血浆血中含大量右旋糖酐,都能使红细胞形成串钱状,被误认为凝集。
1.5寒冷凝集:健康人血清中的冷凝集素效价一般不超过0℃~5℃作用最强,在28℃通常不发生凝集,在肺炎、支原体肺炎、肝硬化等疾病患者中冷凝集素很高,作用温度可升高到36℃,这种冷凝集素能够凝集任何人,包括自己的红细胞,严重干扰血型鉴定。
1.6类B抗原:某些收肠道革兰氏阴性杆菌感染的病人(大肠杆菌086败血症),红细胞获得了类B型,类B的存在血型鉴定时不易觉察。因此,有感染体征病人配血不合时,应考虑类B。
1.7磺胺药物引起的凝集:有人报道一个B型的献血员因阑尾手术用过氨苯磺胺,三个月后,其血请不但能凝集A、AB型的红细胞,也能凝集B型的红细胞。另,青霉素抗体引起的抗凝,注射青霉素后,有些人的血清中含有青霉素抗体,而青霉素可以吸附在红细胞表面,当此红细胞与含有青霉素抗体的血清相遇时便发生凝集。
1.8各种器材要清洁、干燥或用等渗盐水洗涤,防止溶血。
2试验探讨
根据上述影响血型鉴定的因素,我们做了以下几方面的实验观察。
2.1标准血清效价分析:取抗A、抗B标准血清用无菌盐水分别稀释成1∶2∶1∶4-256等8个稀释度,另取小试管16支,排成两排,编号并标记,然后分别取抗A、抗B不同稀释度的血清0.1毫升放入相应的试管中,将已知A型、B型血球配成5%红细胞生理盐水悬液,各取0.1毫升,加入相应血清稀释管中(每管各加0.1毫升),轻轻混匀后离心沉淀2分钟,每分钟2000转,取出观察,抗A血清中的凝集价1:128,抗B血清凝集价1”64为合格。
2.2红细胞浓度对血型检查的影响:取已知A型或B型红细胞有生理盐水稀释成0.5%、1.0%、2%、3%、4%、5%红细胞悬液后用合格标准血清进行血型鉴定5分钟-10分钟观察结果,结果2%-5%红细胞悬液凝集颗粒明显,红细胞浓度低于2%,凝集颗粒细小,肉眼不易观察:在显微镜下观察,才能对结果明显判断。
2.3标准血清变质细菌污染的观察:取抗A、抗B标准血清掺入一定数量的革兰氏阴性杆菌,三天后进行试验,将每毫升标准血清分别加入10、15、30、50、100万株,然后用已知A型、B型血球做血型鉴定,实验结果符合要求对血型鉴定无影响。
3讨论
3.1血型检查影响因素过多,本文根据实验室现有条件对上述几方面主要影响因素做了分析及试验探讨,主要对标准血清质量鉴定、红细胞浓度梯度、细菌污染等方面对血型鉴定的影响做了相对实验,结果:红细胞浓度在2%-5%之间对血型鉴定影响,低于2%凝集颗粒细小,时间延长尤其是夜间因灯光的影响更不便于观察,标准血清不需符合规定要求,关于标准血清污染细菌,经过我们人为掺入革兰氏阴性杆菌,每毫升含100玩细菌以内,对血型鉴定几乎无影响。
3.2血型检查质量管理措施:根据我们的工作和实际工作中出现的情况,对血型检查从采集标本到发出报告全过程都要严格把关,一切按正规操作,我们采用玻片法,所用器材必须洁净干燥(或用等渗盐水洗涤)防治溶血,标准血清符合规定要求,用后及时放冰箱保存。红细胞悬液以5%为最好,不低于2%,除此之外增加工作责任心,严格查对检查制度,夜间在显微镜下观察为宜,5分钟-10分钟判定结果。冬季应注意保暖,避免冷凝干扰结果,有关药物因素对血型结果的影响,有待于进一步探讨。
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