药理检测技术.PPT

药理检测技术 药理研究的方法实际上是利用西药药理学的方法。西药药理学的实验方法种类繁多，各有其优缺点和特殊用途，根据实验对象的性质等因素了分为以下几个方面。 (一) 实验药理学方法 大致有三种形式： 1．对健康不麻醉动物进行主要药效学、药代动力学等观察。 2. 对麻醉动物进行活体解剖以研究中药对于某些器官或系统的影响； 3．采用离体动物器官、组织、细胞或细胞器进行“离体实验”或“试管实验”‘这些方法对于分析中药作用、作用部位和作用机制以及古代动力学过程均有重要意义。 (二) 实验治疗学方法 这是预先用实验病理学方法使动物产生病理变化，或造成病理模型以观察中药治疗作用的一种方法。如家兔喂食含1％双氢胆固醇饲料，2～4周即可形成多发性胆固醇结石；大鼠在乙醚麻醉下剖腹，于幽门和十二指肠处结扎，19小时后取胃剖检，胃粘膜可出现多处浅表性出血性溃疡。小鼠腹腔注射10％蛋黄可使血脂升高。对这些动物模型分别给予相应的中药治疗，观察其治疗效果。这种实验方法既可在整体动物（体内）进行，也可采用培养细菌、病毒、寄生虫及肿瘤细胞等方法在体外进行试验。 (三) 临床药理学方法 由于种属差异，动物实验的结果不能直接搬用于人体，因此，在通过系统的动物实验取得充分资料后，还必须在人体进行观察，只有这样才能对中药作出最后的准确评价，这就是临床药理学方法。由于人体试验必须保证安全，进行人体试验的中药必须要有充分的动物实验资料或古代及民间的使用经验，才能进行人体试用、随着现代科学技术的发展和应用，许多临床药理观察可在不损伤人体的情况下进行。除了采用CT、ECT、MRI等先进仪器进行整体观察以外，还可采用正常人或病人的血液、骨髓、肝活组织等样本，以及外科手术切除的人体组织或器官如子宫、肺叶等，进行体外药理试验。 (四) 新技术在中药药理研究中的应用 随着药理科学的不断深入，药理研究手段逐渐由生理转变为生化或酶学手段为主了。成为分子药理学的主要内容。 药理作用的观测和作用机理的探讨内容包括： 　　（一）观测生理机能的改变。如新药对中枢神经系统产生兴奋还是抑制；对心肌收缩力或胃肠道运动是加强还是减弱；对血管或支气管是扩张还是收缩等。 　　（二）测定生化指标的变化，如血糖、电解质；生理活性物质，如血管紧张素、前列腺素、环磷苷浓度的改变等。 　　（三）观测组织形态学变化，如血细胞大小、甲状腺大小、肾上腺皮质萎缩等 1．核技术的应用 核素有放射性核素和稳定性核素二种。放射性核素可以发出射线，引起物质的电离或激发，而这种电离作用或激发作用可以用正比计数管、盖革—弥勒计数管（G—M计数管）、电离室、半导体探测器和闪烁计数器来测定，不论在体内或离体情况下，凡是有放射性核素存在都可以测定。核技术已较广泛地应用于中药药效学等方面的研究。通过标定中药某种有效成分，通过放射性检测可以了解其在体内的分布情况、存在形式或测定中药作用后体内某些成分含量的变化，有助于了解中药的某些药理作用及作用机理等内容。 a 用于影响心血管系统中药的研究 近年国内对中药影响心肌细胞摄取放射性铷和铯进行了大量的研究工作。心肌对的摄取量很大程度上取决于心肌内毛细血管的开放数量和面积。在—定条件下，心肌营养性血流量与心肌的铷和铯摄取量成正比关系。本法可用小鼠为实验动物，测定灵敏度高，特异性强，安全，操作方便，是筛选抗心绞痛药和治冠心病药的重要研究方法。 b应用放射性同位素测定免疫功能 以-胸腺嘧啶核苷酸（3H-TdR）掺入淋巴细胞转化试验测定细胞免疫功能；以51Cr标记鸡红细胞释放试验测定巨噬细胞吞噬功能；以131I白蛋白胶体颗粒、198Au胶体颗粒及32P标记的金黄色葡萄球菌等颗粒状异物测定单核细胞吞噬功能。实验证明人参、黄芪、冬虫夏草、刺五加等多种中药及多种中药多糖（如银耳多糖、灵芝多糖、人参多糖、香菇多糖等）都具有增强机体免疫功能的作用。如人参皂甙能增加多种多物网状内皮系统的吞噬功能，增强对血中金黄色葡萄球菌、鸡红细胞等的吞噬廓清能力；促进小鼠IgG；、lgA、IgM的生成；促进淋巴细胞转化等。 c用于影响核苷酸中药的研究 用-乳清酸掺入可测定RNA的量，银耳多糖能使正常小鼠RNA的量增加13.6％，3H—TdR掺入能测定DNA的量，淫洋藿、肉苁蓉等能促进羟基脲所形成的“阳虚”动物的DNA合成增加（从5600±848增加到9900±1660cpm／mg。 d用于影响环核苷酸中药的研究 环磷酸腺苷（cAMP）和环磷酸鸟（cGMP）是二种具有重要生物活性的生物信息物质，不仅能传递生物信息，调节细胞代谢和机能活动，而且与多种疾病的发生发展有关。特别是近年