试验二鱼类急性毒性试验.PPT

实验一 鱼类急性毒性实验 实验目的 掌握鱼类急性毒性实验的原理和操作 掌握半致死浓度的计算方法（直线内插法） 实验原理 鱼类对水环境的变化十分灵敏，运用毒理实验方法，观察鱼类在含有化学污染物的水环境中的反应，可以比较不同化学物质的毒性高低。 鱼类毒性实验方法可分为静态方法和动态方法两大类。静态实验方法操作简单，动态实验方法要求具备一定的设备。 本实验介绍静态实验方法。 实验器材、试剂、实验动物 玻璃缸或搪瓷桶 有机磷农药、重金属盐 金鱼 实验步骤 预备实验：参考有关资料初步估计3~4个浓度，每个浓度用3~4尾鱼，观察24~48h。 找出引起实验鱼全部死亡和不引起实验鱼死亡的浓度；同时还要做一些化学测定。 正式实验：根据预备实验得到的浓度范围，按等比级数插入3~5个中间浓度。 表8-1 选择实验浓度的参考数据（根据0.1对数间距） 实验要求 实验中至少选择5个不同浓度，一般以7个浓度较常用，但所选择的浓度应包括有使实验鱼在24h内死亡的浓度，以及96h内不发生中毒的浓度。表中第1纵行包括的浓度最常用。 实验中无论采用何种分组方法，都必须同时设对照组。 结果的观察 正式实验至少进行48h，一般是96h。实验开始后，观察并记录8h、 24h、48h和96h各组鱼的死亡数。实验过程有特殊变化应随时记录。 死亡鱼必须移出实验缸，以免影响水质。 鱼死亡的判断方法：是当鱼中毒停止呼吸以后，用小镊子夹鱼尾柄部，5min内不出现反应可判定为死亡。 半致死浓度的计算 直线内插法是图解计算LC50、TLm、EC50的简便方法。 直线内插法，是根据两个或多个试验浓度组的动物死亡百分数作一浓度——死亡反应线，内插所要求的一个数值。因此，用直线内插法求半数致死浓度时，在试验设置的浓度组中必须至少存在这样两个浓度：一个要能引起50%以上的试验动物死亡，另一个出现的死亡率则要低于50%。 直线内插法的具体作法 用直线内插法求LC50时，在半对数坐标纸上，以对数轴表示试验溶液的浓度，算术坐标表示试验动物的死亡百分数，绘出与试验所得数据相应的各点。将死亡率50%上下的两点做一直线，再自所作直线与50%死亡线的交点作一垂直于纵轴的垂线，该垂线与纵轴的交点即为所求的半致死浓度。如无半对数纸，也可用方格纸代替，但应先将浓度作对数转换，然后以纵轴表示之。垂线与纵轴的交点为LC50的对数，故需查反对数表才得半致死浓度。 实验注意事项 先配制高浓度的储备液，实验时稀释所需浓度的使用液。 先把药液与水均匀混合后，再放入实验鱼，以免实验鱼接触到不均匀的高浓度药液而造成提前死亡。 实验水的温度、pH值（6.7~8.5）、溶解氧（ 4.0mg/L）、硬度和水量（ 0.5 L/克鱼）的合理与否，对实验结果影响较大。 * 0.00 — 1.00 0.10 1.26 — 0.20 — 1.58 0.30 1.99 — 0.40 — 2.51 0.50 3.16 — 0.60 — 3.98 0.70 5.01 — 0.80 — 6.31 0.90 7.94 — 1.00 -— 10.0 二 一 浓 度 对 数 浓 度 *