溴酚蓝共振光散射探针测定敦煌壁画胶结材料中蛋白质含量.PDF

第AA 卷 第6 期 应 用 化 学 V0JG AA S0G 6 A$$6 年6 月 ! ! ! W(XSH8H YFT3S9C FR 9CXHD W(HZX8[3\! ! ! ZI] A$$6 溴酚蓝共振光散射探针测定敦煌壁画 胶结材料中蛋白质含量 # 陈广德 ! 张艳花 （西北师范大学化学化工学院! 兰州#$$$ ） 摘! 要! 用酸性三苯甲烷染料溴酚蓝（%% ）作为共振光散射探针，对敦煌壁画含不同颜料的胶结材料中的蛋 白质含量进行了定量测定。在’( ) *+ $, %-.//012304.1501 缓冲溶液条件下，在 ) #*6 17 处，以牛血清白蛋白 ! （%89 ）为标准样品绘制工作曲线，测定壁画中含不同颜料的胶结材料中蛋白质结果分别为：红色颜料 :+ #:# ; =$ , ?@ 7? ，白色颜料*+ ;,; ; =$ , ?@ 7? ，蓝色颜料 =+ :*6 * =$ , ?@ 7? ，绿色颜料 =+ $:A $ =$ , ?@ 7? 。对%89 测定的线性范围为$+ #* =$ , B =;+ #$ =$ , ?@ 7C 。平行测定的相对标准偏差（38D ）为 #+ =E ，蛋白质的加标回收率为:6+ ,#E B =$*+ ,;E 。 关键词! 敦煌壁画，颜料胶结剂，共振光散射，蛋白质，溴酚蓝 中图分类号：F,6 G #! ! ! ! ! 文献标识码：9! ! ! ! ! 文章编号：=$$$2$6=;（A$$6 ）$62$*:;2$* 敦煌石窟保留着* G 6 万多平方米* 世纪到=* 世纪的精美壁画。在这些壁画中使用了A$ 多种无机 ［=，A ］ 颜料和一定比例的胶结物质，其中大部分是天然矿物颜料 。胶结物质不仅是颜料附着于墙壁的粘结 剂，而且是壁画得以长期保留的固定剂，对壁画具有十分重要的作用。然而，它又与几乎所有壁画病害 的发生、发展有关，成为了解壁画病害机理、研究保护对策的关键。因此，准确分析古代壁画颜料中胶结 材料种类、数量、现存状况，对于壁画病害的防护技术和防护材料的研究将有重要意义。 古代壁画胶结材料含量甚微，又处在与颜料的混合状态，含有多种杂质，且经过长时间的老化和污 染，很难用一般方法检测。然而，这些胶结材料全部是来自动物或植物的产物，本质上属于天然有机化 合物。具有生物的某种特定结构，即都含有蛋白质。因此，有可能通过对这一特征结构的判定来认识它 们。共振光散射技术测定蛋白质含量［# B ］是基于有机染料在蛋白质大分子上堆积而导致强烈的共振光 散射，光散射强度与蛋白质浓度呈线性关系，具有很高的灵敏度。本文用溴酚蓝作为共振光散射探针对 敦煌壁画颜料胶结材料中蛋白质进行了定量分析，取得了满意结果。 ! 实验部分 !G ! 仪器和试剂 3R26*$ 型荧光分光光度计（日本岛津）；酸度计（意大利(9SS9 公司）；T2#*$$ 型紫外2可见分光光 度计（日本日立公司）。牛血清白蛋白（%89 ）（北京奥博星生物技术责任有限公司进口分装）：称取一定 量牛血清白蛋白配制成水溶液，置于冰箱 = B * U 保存。使用前测定吸光度!A,$ 17 及!A;$ 17 ，由 ) # ［; ］ =+ *6!A;$ 17 $+ *!A,$ 17 （ 为蛋白质质量浓度（=$ ?@ 7C ））计算蛋白质含量 。溴酚蓝（天津市元立化 ［: ］ 工有限公司）：配制成$+ $AAE 水溶液，’( ) *+ $, %-.//012304.150