环境微生物学试验.DOC

《环境微生物学实验》教学大纲 一、基本信息 课程名称 环境微生物学实验 课程编号 ENSE312 英文名称 Environmental Microbiology Experiment 课程类型 本专业推荐选修课 总学时 18 学分 1 实验项目数 6 验证性实验个数 综合性实验个数 2 设计性实验个数 预修课程 基础微生物学 适用对象 环境科学专业 课程简介 （200字左右） 环境微生物学实验是在理论课的基础上设置的，其核心思想是通过环境微生物技术和其他技术方法相结合，在生物与环境和谐、人与环境统一的基础上解决环境问题。 与理论课程相对应，实验课程也分为三部分，第一部分利用传统微生物学手段研究环境微生物，包括环境微生物的分离纯化、培养、鉴定以及数量测定等；第二部分为微生物对环境中污染物以及固体废弃物的生物降解实验，包括有机污染物降解和水解实验等；第三部分利用现代分子生物学手段研究环境微生物，包括环境微生物总DNA的提取以及基于16S rRNA的细菌鉴定等，所涉及的技术包括DNA提取技术、PCR技术以及电泳技术等。 本课程是环境科学专业的一门专业推荐选修课程，是与环境微生物学所对应的实验课程。通过本课程的学习，学生应掌握培养基的制备以及分离纯化和培养计数等技术，掌握从野外微生物群落中获得纯培养菌株的方法和流程，并掌握环境微生物总DNA的提取方法和步骤以及利用PCR技术在属的水平上鉴定环境中细菌类群 序号 实验内容 学时 实验一 筛选培养基的制备以及土壤微生物的分离纯化和培养 3 实验二 土壤中细菌、真菌和放线菌的平板计数 3 实验三 产淀粉水解酶菌株的筛选和活性验证 3 实验四 多环芳烃降解菌的筛选和功能验证 3 实验五 土壤微生物总DNA的提取 3 实验六 细菌16S rRNA基因的PCR扩增和电泳检测 3 合计 18 四、实验内容及教学要求? 实验一: 筛选培养基的制备以及土壤微生物的分离纯化和培养 本实验目的：了解微生物培养基种类及配置原理，微生物培养基的配制程序了解微生物培养基的种类及配置原理，理解微生物培养基的配制程序，掌握牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、马丁氏培养基、基础盐培养基和CMC-Na培养基的配制方法。 微生物培养基的配制程序牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基马丁氏培养基本实验目的：了解利用培养基筛选产水解酶菌株的原理，掌握从土壤中分离筛选产水解酶菌株的方法。 本实验教学要求：了解利用培养基筛选产水解酶菌株的原理，掌握从土壤中分离筛选产水解酶菌株的方法。 本实验重点、难点：重点是利用培养基从土壤中分离筛选产水解酶菌株；难点是利用培养基验证产水解酶菌株活性的原理。 培养基培养基培养基实验五: 土壤微生物总DNA的提取 本实验目的：熟悉从土壤中提取微生物总DNA的原理，掌握从土壤中提取微生物总DNA的方法。 本实验教学要求：了解从土壤中提取微生物总DNA的原理和各种土壤总DNA提取方法，理解土壤微生物总DNA提取过程中各种试剂的作用，掌握从土壤中提取微生物总DNA的原理的方法。 本实验重点、难点：重点是利用直接法从土壤中提取微生物总DNA的方法；难点是土壤微生物总DNA提取过程中所使用的各种试剂的作用以及影响DNA提取效率的因素。 实验六: 细菌16S rNA基因的PCR扩增和电泳检测 本实验目的：了解以通用引物进行16S rNA基因 PCR扩增的基本原理，掌握从土壤微生物总DNA中进行16S rNA基因PCR扩增的方法。 本实验教学要求：了解以通用引物进行16S rNA基因PCR扩增的基本原理，理解以细菌通用引物扩增细菌16S rNA基因的目的，掌握从土壤微生物总DNA中进行16S rNA基因PCR扩增的方法。 本实验重点、难点：重点是利用PCR技术从土壤微生物总DNA中进行16S rNA基因扩增并进行电泳检测；难点是PCR扩增技术和电泳技术的基本原理以及影响PCR扩增的因素。 课程考核分课堂表现和实验报告两部分，前者占总成绩30%后者占总成绩70%，总成绩由两部分加合生成 教? 材：《环境微生物学实验指导》，郑平主编，浙江大学出版社，2005年，标准书号：ISBN 7-308-04184-0。 参考书：《环境微生物实验技术》，陈坚、刘和、李秀芬、华兆哲编著，化学工业出版社，2008年，标准书号：ISBN 978-7-122-02615-6。 《环境工程微生物学实验》，苑宝玲、李云琴编著，化学工业出版社，2005年，标准书号：ISBN 7-5025-7771-8。 大纲修订人： 刘 娟 大纲审定人： 修订日期：2015年4月30日 1