山药中黄酮提取工艺优化.doc

山药中黄酮提取工艺优化摘要：采用热浸提法提取山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｂａｔａｔａｓ）中的黄酮，在单因素试验的基础上设计正交试验探讨乙醇体积分数、浸提时间、浸提温度和料液比对黄酮提取率的影响。结果表明，优化后的试验条件为体积分数７０％的乙醇作为提取剂，料液比１∶２０（m：V，g/mL），在５０ ℃提取１２０ ｍｉｎ。 关键词：山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｂａｔａｔａｓ）；黄酮；热浸提法；优化 中图分类号：Ｓ５３１．９；Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）17－3824-03 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｙａｍ ＺＨＯＵ Ｈｏｕ－lｉａｎｇ，ＷＡＮＧ Ｌｉａｎg－jｉａｎ，ＸＩＥ Ｌｉｎｇ－lｉ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｙａｎｇｔｚｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｊｉｎｇｚｈｏｕ ４３４０２５，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｙａｍ （Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｂａｔａｔａｓ） ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｈｏｔ ｌｉｘｉｖｉａｔｉｏｎ． Ｌ９（３４） ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔｓ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｆｒａｃｔｉｏｎ of ｅｔｈａｎｏｌ ｖｏｌｕｍｅ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ， ｌｉｑｕｉｄ ｔｏ ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗｅｒｅ， ｖｏｌｕｍｅ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ， ７０％；ｓｏｌｉｄ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ １∶２０（m：V，g/mL）； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ， １２０ ｍｉｎ； ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，６０ ℃． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃｈｉｎｅｓｅ ｙａｍ （Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｂａｔａｔａｓ）； ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ； ｈｏｔ ｌｉｘｉｖｉａｔｉｏｎ； ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ 山药为薯蓣科多年生宿根蔓草植物山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｂａｔａｔａｓ）的块根，营养价值高，有些品种还有较高的药用价值，是良好的滋补强壮剂，对肾脾病、糖尿病、慢性肠炎等有辅助疗效，也是重要的出口特产蔬菜之一［１］。黄酮类化合物是药用植物的主要活性成分之一，相关药理和临床实验证实，黄酮类化合物具有广泛的药理功能，如不少治疗冠心病的中草药或活血化瘀类中药中均含有黄酮类化合物芦丁、槲皮素、葛根素等；染料木素、金雀花异黄酮、大豆甙元等具有雌性激素样作用［２，３］。本试验采用热浸提法提取山药中的黄酮，通过单因素试验和正交设计考察乙醇体积分数、浸提时间、料液比、浸提温度对黄酮提取率的影响，为山药黄酮的利用奠定基础。 １ 材料与方法 １．１ 试验材料及试剂 材料：山药，市售。选择新鲜、无霉点、无腐烂、粗细均匀的山药去皮清洗干净，切成小块，于８５ ℃烘干后用粉碎机粉碎，过６０目筛，得山药粉。 主要试剂芦丁、亚硝酸钠、无水乙醇、硝酸铝和氢氧化钠等试剂均为分析纯。 １．２ 试验方法 １．２．１ 单因素试验 采用热浸提法提取山药中的黄酮，设置单因素试验分别考察乙醇体积分数、浸提时间、料液比、浸提温度对黄酮提取率的影响。①乙醇体积分数。称取１ ｇ山药粉５份，分别加入５０％、６０％、７０％、８０％、９０％的乙醇（体积分数，下同）２０ ｍＬ，于５０ ℃浸提２ ｈ，５ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，取上清液定容到５００ ｍＬ。②浸提时间。称取１ ｇ山药粉５份，加入２０ ｍＬ ６０％的乙醇，６０ ℃下分别提取４０、８０、１２０、１６０和２００ ｍｉｎ。③料液比。称取１ ｇ山药粉５份，分别按１∶１０、１∶１５、 １∶２０、１∶２５、１∶３０的料液比（ｍ∶Ｖ，ｇ／ｍＬ，下同）加入８０％的乙醇，于 ６０ ℃浸提２ ｈ。④浸提温度。称取１ ｇ山药粉５份，加入２０ ｍＬ ８０％的乙醇，分别置于４０、５０、６０、７０和８０ ℃温度条件下浸提２ ｈ。 １．２．2 正交试验 根据单因素试验结果，采用Ｌ９（３４）正交试验进一步考察乙醇体积分数、浸提时间、料液比和浸提温度４个因素对黄酮提取率的影响，正交试验因素与水平见表１。 １．２．3 黄酮含量的测定［４－８］ ①芦丁标