组胺酸脱羧酶基因敲除小鼠学习记忆和海马CA1区突触可塑性改变.pdf

新江太季博士季往论麦——冀要 组胺酸脱羧酶基因敲除小鼠学习记忆和海马 CAl区突触可塑性的改变 浙江大学医学院 药理学 2005年博士研究生 刘乐英 导 师 陈 忠 摘 要 组胺是体内广泛存在的自体活性物质和炎症介质，在20世纪80年代两个研究 组同时用免疫组织化学的方法证实了组胺能神经元主要分布在下丘脑，组胺在中 枢神经系统中的作用才逐渐为人们所承认和重视。目前认为脑内组胺能神经元广 泛分布于下丘脑的结节乳头核(nucleus 组胺能神经元分布的唯一区域，但其轴突可以投射到脑内的绝大部分区域，包括 丘脑、杏仁核、海马结构、大脑皮层等。组胺在脑内由其前体组胺酸(L-histidine) 脱羧生成，组胺酸脱羧酶(histidine 合成酶。在中枢神经系统，组胺有三种受体(H1、I-12、H3)，均已得到分离鉴定， 它们属于G蛋白偶联受体超家族。具有七个跨膜区域。Hl受体与磷脂酶c kinase A)耦联．H3受体与CA／Go藕联，是突触前自身受体，对组 激酶A(protein 胺的释放有抑制作用，也影响组胺的合成。同时，它也是异源性受体，在黑质纹 状体、杏仁核，大脑皮层等区域调节其它递质的释放。总体上，HI和1t2受体对神 经元起兴奋性作用，或增强其兴奋性传入。相反，H3受体激活对TM神经元产生 负反馈抑制，并能抑制神经递质的释放。 2 浙扛太季博士季位论文——冀要 组胺作为神经系统的递质或调质，在许多中枢活动中起着重要的调节作用， 如神经内分泌调节、饮水摄食调节、体温调节、觉醒一睡眠，运动，攻击行为以 及学习记忆等。学习记忆是脑的高级功能，在许多发病率较高的中枢神经系统疾 病中，病人的学习记忆功能均受到不同程度的损害。因此，组胺与学习记忆的关 系成为越来越多的研究者致力的热点问题。但随着研究的深入。人们发现组胺系 统对学习记忆的影响十分复杂，对组胺以及组胺系统的相关药物在行为学方面的 研究均出现不一致的结果。其中较为重要的原因是，组胺系统的药理学工具特异 性相对较低，并没有选择性的、能够显著持久的抑制脑内组胺合成，及同时拮抗 所有组胺受体的工具药。因此，越来越多的研究者采用HDC基因敲除(HDC-KO) 小鼠来探讨组胺长期缺乏后对学习记忆的影响。研究表明，HDGK0小鼠对物体的 辨别记忆能力较其野生型(wild type，WT)小鼠下降，而在水迷宫和被动回避反应 的学习记忆能力增强，并认为其与多巴胺的负性增强有关。但是这种假设需要在 其它学习记忆模型中进一步证明，同时这些研究均停留在行为学水平，没有探讨 其增强效应的深入机制。由于背景和空间学习记忆与海马结构的突触可塑性密切 相关，在组胺的长期缺乏的情况下是否影响HDC-KOd、鼠的海马的突触可塑性，而 且在学习记忆的行为学任务中，这种突触可塑性是否发生改变，如何改变，至今 仍不清楚． 因此为了进一步研究组胺长期缺乏对学习记忆的影响及其深入机制，本研究 采用海马依赖的背景恐惧记忆模型，观察HDC-KO小鼠的学习记忆改变；同时用细 胞外电生理记录HDC-KOtb鼠突触可塑性的改变，探讨行为学改变的生理机制。 浙江大季博士晕位论文——奠姜 第一部分HDC基因敲除小鼠背景恐惧记忆的改变 fear 近年来，恐惧条件反射模型(Pavlovian conditioning)逐渐成为研究学习 fear 记忆神经生物学机制的主要行为学模型，分为背景恐惧条件反射(cntextual fear con