促红细胞生成素对多发性骨髓瘤小鼠铁调蛋白hepcidin和肿瘤增殖影响及机理.pdfVIP

促红细胞生成素对多发性骨髓瘤小鼠铁调蛋白hepeidin和肿瘤增 殖的影响及机理 摘要 【研究背景】 慢性病贫血(ACD)是一种伴发于急慢性炎症、感染或恶性肿瘤的临床贫血 综合征，铁代谢障碍被认为是ACD发病最重要的机理。新发现的小分子肽铁调蛋 白hepeidin被认为是铁代谢的中心调节因子，它一方面与膜铁转运蛋白FPN结合， 导致铁输出减少；另一方面可抑制肠道铁吸收蛋白如DMTl的表达，是造成ACD 铁代谢异常的直接原因。目前尚缺乏肿瘤性ACD模型中对hepcidin的研究。使用 促红细胞生成素(EPO)是治疗ACD的主要手段之一，并且EPO被证实可在体外 正肿瘤性贫血的同时存在刺激肿瘤增殖的风险，但对多发性骨髓瘤的影响尚无定 论。 【研究目的】 1．了解多发性骨髓瘤的长期荷瘤小鼠模型是否出现ACD。 FPN是否有相应的改变。 3．探讨EPO是否对多发性骨髓瘤荷瘤小鼠的hepeidin表达有抑制作用，其作用机 理如何。 4．了解EPO是否可刺激多发性骨髓瘤的肿瘤生长。 【研究方法】 1．用多发性骨髓瘤细胞株注射于小鼠皮下，建立长期荷瘤模型，检测小鼠贫血及铁 代谢指标。 time 2．用Real PCR半定量法检测荷瘤小鼠与正常小鼠肝脏hepcidin、肝脏及十二 指肠DMTl及FPN的mRNA表达。 mRNA表达的变化，同时检 无干预荷瘤小鼠肝脏hepeidin、十二指肠DMTl及FPN ’ 的作用机理。 4．流式细胞仪测量多发性骨髓瘤细胞株及患者原代肿瘤细胞中EPOR表达情况。 5．体外培养骨髓瘤细胞株，用CCK．8法检测EPO对细胞增殖的影响。 6．采用骨髓瘤荷瘤模型，观察EPO对肿瘤增殖的作用。 4 【结果】 1．小鼠荷瘤6周后出现贫血、血清铁及转铁蛋白饱和度下降，骨髓涂片铁染色提示 红细胞内铁减少、吞噬细胞内铁增多。 mRNA高于正常同龄小鼠，其肠道DMTl、FPN及 2．骨髓瘤荷瘤小鼠肝脏hepcidin 肝脏FPNmRNA水平明显降低，肝脏DMTlmRNA无变化。 mRNA水平， 3．采用短期EPO、长期EPO或IL一6抗体均可明显抑制肝脏hepcidin 但长期EPO及IL一6抗体可升高肠道DMTl及FPNmRNA水平，仅长期EPO可升 高肝脏FPNmRNA。 4．EPO治疗后肝脏IL．6mRNA水平降低，短期EPO降低了肝脏BMP4mRNA水平， 但长期EPO则对其无影响。 5．骨髓瘤细胞株及原代患者骨髓瘤细胞可表达EPOR；但EPO不能在体外刺激骨 髓瘤细胞增殖，也对骨髓瘤荷瘤小鼠的瘤块无刺激生长的作用。 【结论】 1．多发性骨髓瘤长期荷瘤模型是一种肿瘤一ACD模型。 mRNA升高。 2．多发性骨髓瘤荷瘤小鼠肝脏hepcidin 3．EPO可明显抑制肝脏hepcidinmRNA水平。 长期EPO则可能通过抑制IL-6水平来达到降低hepcidin的作用。 5．骨髓瘤细胞可表达EPOR，但EPO对骨髓瘤无刺激肿瘤生长的作用。 【关键词】 多发性骨髓瘤；慢性病贫血；铁调蛋白；二价金属离子转运体l；膜铁转运蛋白； 促红细胞生成素。 Effectsandmechanismsof on and erythropoietinhepcidin inmice model tmnor s． growth myeloma Abstract 【BACKGROUND】 all Anemiaofcllromc anemic concomitantwi