说明书和标签20160219.DOC

附件2 一、禽白血病病毒ELISA群特异抗原检测试剂盒说明书和标签 【兽药名称】 通用名 商品名 无 英文名 Avian Leukosis Virus ELISA Group Specific Antigen Test Kit 汉语拼音 Qinbaixuebingbingdu ELISA Qunteyi Kangyuan Jianceshijihe 【主要成分与含量】 试剂盒中含有如下成分： 组分 规格 数量 包被板 96孔/块 5块 阳性抗原对照 2.0ml 1管 阴性抗原对照 2.0ml 1管 10倍浓缩洗涤液 250ml 1瓶 酶标抗体 50ml 1瓶 底物溶液 50ml 1瓶 终止液 50ml 1瓶 说明书 份 1份 【性状】 （1）包被板（96孔板） 包装袋封闭良好，表面光洁、无裂纹、包被板孔底清洁透明、无异物，装量为5块/盒。 （2）阳性抗原对照 无色澄清液体，无沉淀物，装量为2.0ml/管，1管/盒。 （3）阴性抗原对照 无色澄清液体，无沉淀物，装量为2.0ml/管，1管/盒。 （4）10倍浓缩洗涤液 无色澄清液体，装量为250ml/瓶，1瓶/盒。 （5）酶标抗体 淡黄色澄清液体，无沉淀物，装量为50ml/瓶，1瓶/盒。 （6）底物溶液 无色或淡蓝色澄清液体，无沉淀物，装量为50ml/瓶，1瓶/盒。 （） 无色澄清液体，无沉淀物，装量为50ml/瓶，1瓶/盒 【作用与用途】 用于检测禽白血病病毒p27群特异抗原。 【用法与判定】 1 样品处理 1.1 取全蛋，破碎后取蛋清，置-20℃以下冻融1次，用微量移液器吸取蛋清直接进行检测。 1.2 泄殖腔拭子 用无菌棉签于待检鸡只泄殖腔取样后，放入1ml PBS（0.01mol/L，pH值7.4）中，置﹣20℃以下冻融1次，恢复室温后，剧烈震荡1分钟，挤出棉签中的液体，弃棉签。液体在2~8℃下、以12000r/min离心1分钟，取上清直接进行检测。 1.3 病毒培养液 取病毒培养液，以8000r/min离心10分钟，取上清直接进行检测。 2 用法 2.1 25℃）。试剂应轻轻地旋转或震荡予以混合。 2.2 取出包被板（根据样品多少可拆开分次使用），将10倍浓缩洗涤液用双蒸水稀释10倍后备用。 2.3 包被板上对照和待检样品添加如下所示。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A N S1 S2 S3 S4 B N C P D P E F G H （注：“P”表示阳性抗原对照；“N”表示阴性抗原对照；“S1、S2、S3、S4”等表示待检样品） 2.4 加入处理好的待检样品，100μl/孔，同时设阴、阳性抗原对照（各2孔），100μl/孔，在37℃下孵育1小时。 2.5 甩去孔内液体，用稀释好的洗涤液洗涤包被板，300μl/孔，洗涤4次，拍干。 2.6 加入酶标抗体，100μl/孔，在37℃下孵育1小时。 2.7 洗涤，方法同2.5。 2.8 加入底物溶液，100μl/孔，在室温（15～25℃）下、避光孵育15分钟。 2.9 加入终止液100μl/孔，轻微震荡混合均匀后，在450nm的波长下读数（应在加入终止液后15分钟内完成读数），并记录结果。 2.10 计算公式 S/P值= 待检样品OD450nm值－阴性抗原对照平均OD450nm值 阳性抗原对照平均OD450nm值－阴性抗原对照平均OD450nm值 3 3.1 试验结果有效的条件：阳性抗原对照孔的平均OD450nm值＞0.20，阴性抗原对照孔的平均OD450nm值＜0.10。 3.2 检测样品S/P值≥0.155时，判定为阳性样品；检测样品S/P值＜0.155时，判定为阴性样品。 【注意事项】 （2）不同批号的试剂盒内的试剂组分不能混用；不同试剂在使用时，应防止交叉污染。 （3）使用前，应将试剂盒中的各液体成分充分摇匀，平衡至室温。 （4）稀释1037℃下使其溶解后再使用，不影响试剂盒的检测效果。 （5）包被板拆封后未使用，应放回铝箔袋并封口，2～8℃保存，应避免受潮，试剂盒使用完毕后应置2～8℃保存。 （6）应避免使用金属类器物盛装或搅拌试剂。 （7）勿将底物溶液暴露于强光下。 （8）本品终止液为硫酸，避免同眼、皮肤接触。如接触，应用清水迅速冲洗接触部位。 （9）应严格按照试剂盒说明书进行操作，严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。 （10）移液系统应保证准确清洁，应在提供准确液体体积的同时防止交叉污染