7,8-二羟基黄酮的舒张血管及降压作用研究.pdfVIP

7，8．二羟基黄酮的舒张血管和降压作用研究 摘要 体的特异性激动剂。7，8-DHF激活TrkB受体产生重要的生物学作用。在对神经退 行性疾病(帕金森氏症和阿尔茨海默病)、学习记忆损伤、情绪障碍等的研究中都 发现，7，8-DHF通过作用于TrkB受体发挥神经保护作用，能够使神经元免受伤害， 并引起行为学上的改变(例如学习记忆能力提高和抗抑郁)。TrkB受体广泛分布于 身体的各个部位(如血管)，因此7，8-DHF可能能够通过激活TrkB受体作用于身 体的其他部位而发挥生物学作用。然而，至今为止，关于7，8-DHF作用于其他组 织器官发挥作用的报道还很少。很多黄酮类化合物在心血管功能调节中发挥了重要 作用。7，8-DHF作为一种黄酮类化合物，目前已经发现其具有多方面的功能，但是 在心血管功能方面的研究也还未见报道。 为此，本研究针对7，8-DHF在心血管功能方面的作用进行了如下探讨： 1．利用血管灌流方法，针对大鼠胸主动脉环进行研究，探讨7，8-DHF对完整 内皮血管和去内皮血管的舒张作用及量效关系。 2．利用TrkB受体的特异性拮抗剂ANA-12以及其它影响血管舒张功能的阻断 剂，通过血管灌流方法观察7，8-DHF的血管舒张作用机制。 3．利用Western blotting方法对eNOS的表达量和磷酸化水平进行研究，进一 步探讨在完整内皮血管7，8-DHF引起舒张作用的机制；并在原代培养的血管平滑 肌细胞(VSMC)，进一步验证7，8-DHF对胞内钙信号的影响。 4．利用尾静脉注射和灌胃给药法，将7，8-DHF给予自发性高血压大鼠(SHR)， 观察其对SHR血压的影响。 实验结果 1．在完整内皮和去内皮血管中，7，8-DHF能够剂量依赖性地引起苯肾上腺素 (PE)预收缩的大鼠胸主动脉环舒张。在完整内皮血管，半最大效应浓度(EC50) --24 J．tmol／L；而在去内皮血管，EC50=104 J_tmol／L。表明7，8-DHF的血管舒张作 用部分依赖于内皮细胞。 2．对于完整和去内皮血管，TrkB受体的特异性拮抗剂ANA．12都不能阻断7， 8-DHF的血管舒张效应。 3．对于完整内皮血管，利用NOS阻断剂L-NAME，可溶性鸟苷酸环化酶(sGC) 阻断剂ODQ预孵育血管后，7，8-DHF的血管舒张作用明显减弱。而环氧合酶(COX) 阻断剂吲哚美辛没有阻断7，8-DHF的血管舒张作用。表明7，8-DHF的血管舒张 作用依赖于NO．cGMP通路，与前列环素(PGl2)无关。利用Westem blotting方法， 进一步验证NO．cGMP通路的作用，结果表明，7，8-DHF能够引起胸主动脉eNOS 的表达量和磷酸化水平显著性提高。 4．对于去内皮血管，通过无钙复钙实验方法，我们观察到30，100和3009mol／L 的7，8-DHF能够引起无钙溶液中PE引起的血管收缩幅度显著性降低。当浴槽溶 液中钙离子浓度逐渐增加后，血管环会随着钙离子浓度的增加进一步收缩，但与对 照组相比，三个浓度的7，8-DHF都能引起收缩强度显著性降低，这表明7，8-DHF 能够阻断细胞内钙释放和外钙的内流。由于PE引起的收缩主要是通过受体操控的 钙通道(ROCC)，因此7，8-DHF可能通过阻断ROCC引起去内皮血管的舒张。 在原代培养的血管平滑肌细胞，7，8-DHF同样能够抑制PE引起的胞内钙荧光信号。 利用同样的方法，对高钾引起的血管收缩进行研究，与对照组相比，100和 能通过阻断电压依赖性钙通道(VDCC)引起血管环的舒张，而不是通过影响钾通 道。 因为在去内皮血管，各种钾通道阻断剂都不能阻断7，8-DHF的血管舒张效 应。 ’ 5．灌胃给予7，8-DHF，2h后能够引起SHR的舒张压(DBP)显著性降低， 使SBP和DBP均显著性降低。 综上所述，7，8-DHF能够剂量依赖性地引起大鼠胸主动脉血管平滑肌的舒张， 舒张作用与NO—cGMP通路和阻断浆膜钙通道有关，与TrkB受体以及钾通道无关。 有效降低DBP，SBP没有显著性差异。本研究为7，8-DHF的进一步应用提供了良 好的实