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第1节 基因工程概述复习学案 学习目标：1、说出基因工程的概念 2、简述基因工程的诞生历程 3、说出DNA重组技术所需的三种基因工具的作用 4、简述基因工程基本操作程序的步骤 学习重点：1、说出DNA重组技术所需的三种基因工具的作用 2、简述基因工程基本操作程序的步骤 学习难点：简述基因工程基本操作程序的步骤 知识梳理： 一、基因工程的诞生和发展： 基因工程的诞生和发展经历了三个时期：1973—1976年为 ，1977—1981年为 ，1982年以后为 。 1973年，美国科学家 等将两种不同来源的DNA分子进行体外重组，并首次实现了在大肠杆菌中的表达，创立了 的新技术———基因工程。 二、基因工程的概念：是指在 通过 等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入 并使重组基因在受体细胞中表达，产生人类所需的 的技术。因此，基因工程又称为。剪切拼接导入表达人类需要的基因产物 1、来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。 2、作用：能够识别双链DNA分子的 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 3、特点:具有专一性，表现在两个方面： ① ② 4、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 末端和 末端。 [来源:学科网ZXXK]根据酶的来源不同，可分为EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较： ⑴相同点：都缝合 ⑵区别：E．coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能使 之间连接；T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低。 ㈢载体——“ ” 1、载体的作用： 。 2、载体具备条件： 3、载体： 四、基因工程的基本过程 ㈠获得目的基因（目的基因的获取） 1、获取方法主要有三种：⑴从自然界中已有的物种中分离出来，如可从 中获取。⑵用 合成。⑶利用90～95℃ DNA解链为单链； 第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 （5）特点：指数形式扩增 ㈡制备重组DNA分子（基因载体1、重组DNA分子的组成： 、 、 、 、 。 2、方法：用 分别切割载体和目的基因，再用 把两者连接。 ㈢转化受体细胞（将 导入受体细胞） 1、转化的概念：常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法 ⑵将目的基因导入动物细胞：最常用的方法 ⑶将目的基因导入微生物细胞： ㈣筛选出获得目的基因的受体细胞、培养受体细胞并诱导目的基因的表达（目的基因的检测与鉴定） 1、分子水平的检测： ⑴首先要检测 ⑵其次还要检测 ⑶最后检测 2、个体生物学水平的鉴定：有时还需进行1．已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 A．3 B．4 C．9 D．12下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是 A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法 B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉