均匀设计对大肠杆菌产谷氨酸脱羧酶培养基优化的应用.pdfVIP

第34卷第5期 湖南农业大学学报(自然科学版) V_01_34NO．5 2008年 l0月 JournalofHunanAgriculturalUniversity(NaturalSciences) 0ct．2008 文章编号：1o07．1032(2008)05．0531．O3 均匀设计对大肠杆菌产谷氨酸脱羧酶培养基优化的应用 左 斌 ，胡 超 ，谢达平 (湖南农业大学 生物科学技术学院，湖南 长沙 410128) 摘 要：为提高大肠杆菌单位发酵液中谷氨酸脱羧酶的产量，采用均匀设计，对培养基组成与发酵条件等9因 素进行优化，后续分析以逐步线性回归、偏最小二乘回归建模并推论最优组合 ，结果表明：1)基于逐步线性回 归模型，最优组合酶活性预测值(1．611)高于实测值(1．263)，表明各因素与酶活性间更多地呈现非线性关系．2) 基于二次多项式偏最小二乘回归和二次多项式偏最小二乘回归(考虑互作项)获得的最优组合相同，但酶活性预测 值 (2．090)高于实测值 (0．927)；基于二次多项式偏最小二乘回归 (考虑平方项)获得的最优组合预测值(1．920) 与实测值 (1．933)接近．显示各因素与酶活性更多地呈现二次曲线关系，但各因素间的交互作用并不明显．3) 基于均匀设计和二次多项式偏最小二乘回归 (考虑平方项)，仅经2轮共23次试验，即高效筛选得一满意组合： 牛肉膏 8g／L，蛋白胨 15 L，Nacl2．79 L，谷氨酸 0．5 L，葡萄糖3 L，磷酸二氢钾4g／L，硫酸镁0．56 L， pH6．87，发酵时间 18h；实测酶活性 1．933，高于初始组合的酶活性(1．528)． 关 键 词：均匀设计；偏最小二乘回归；谷氨酸脱羧酶；发酵高产酶配方优化 中图分类号：Q93 文献标识码：A ApplicatiOn0funif0rm designmeth0dinmedium Optimizati0n fbr2lutamatedecarbOxVlase ZUo Bin，HU Cha0，XIE Da—ping (CoUegeofBioscienceandBiotechno1ogy，HNAU，Changsha410128，China)) Abstract：T0impr0vetl1eproductiOnOfG D inperunitOfmedium，unif0n11designmetllodwasusedtooptimize廿1e medium inninefactorswithsatisfhctoryresults．1)BaSedon廿1estepwiseregression，itindicatedmataUfactorsandthe dependent∞ 63oarenonlinear，meactua1testvaluesareDD630(0．927)，thepredicationValuesare( 630(1．611)．2)Based onmePartialLeastSquareRe ession(PLS)andmePartialLeastSquareRegression(mutua1)itindcaledtllattlleactIIaltest values0D630(1．263)arenotfitformepredictedvalues(1．611)．3)BasedontllePaItia1LeastSquareRegression(square)it indcatedthattheactualtestvaluesDD 0f1．933)arecl0set0mepredictedvalues(1．920)．AUresultsshowedt11attllere1ation betweentargetsandfactOrsismoreincurvetllanon1ermOdelsbutaI1factorswereweakinmutua1．Ittakeson1yt、v