增强大肠杆菌犕犈犘2通路发酵生产抗癌药物紫杉醇前体.PDFVIP

第 卷第 期 重 庆 大 学 学 报 ４０ ７ Ｖｏｌ．４０Ｎｏ．７ 年 月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｏｎ ｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ ２０１７ ７ ｇｑ ｇ ｙ Ｊｕｌ．２０１７ ： ／ ｄｏｉ１０．１１８３５ ．ｉｓｓｎ．１０００５８２Ｘ．２０１７．０７．０１２ ｊ 增强大肠杆菌犕犈犘２通路发酵生产抗癌药物紫杉醇前体 黄晓斌，仲蕾蕾 （重庆大学 生命科学学院，重庆 ４０００４４） 摘 要：用合成生物学的方法构建模块，使大肠杆菌遗传背景发生改变，生产红豆杉次生代谢 　 产物紫杉醇前体物质——— （）， （ ）紫杉二烯（ ）。首先，用基因工程操作手段构建 ４５ １１１２ Ｔａｘａｄｉｅｎｅ （ ， 甲基 赤藓糖醇 磷酸途径）模块，这个模块 ＭＥＰ２２ＣＭｅｔｈｌＤＥｒｔｈｒｉｔｏｌ４Ｐｈｏｓｈａｔｅ２Ｃ Ｄ ４ ｙ ｙ ｐ 包括 个基因： 、 、 和 ，个基因的表达产物属于大肠杆菌固有途径中的几个酶蛋 ４ ｉｓＣｉｓＥｉｓＨ ｉｓＧ４ ｐ ｐ ｐ ｐ 白；模块构建好后，通过电穿孔的方式把 ＭＥＰ２转化到已含有上游ＭＥＰ１模块和下游ＴＧ模块的大 肠杆菌中，改变大肠杆菌固有的遗传信息。再用异丙基硫代半乳糖苷（ ）诱导所转入基因的表 ＩＰＴＧ 达，最后用气相色谱 质谱（ ）方法检测表达情况。成功构建 模块；通过与 模块  ＧＣＭＳ ＭＥＰ２ ＭＥＰ１ 和 模块的组合实验， 模块能加强菌株表达紫杉二烯。结果表明，微生物大肠杆菌可以通 ＴＧ ＭＥＰ２ 过基因工程改造手段来生产植物天然药物紫杉醇前体物质 （）， （ ）紫杉二烯以及其他中间体。 ４５ １１１２ 关键词：合成生物学；生物发酵；（）， （ ）紫杉二烯 ４５ １１１２ 中图分类号： 文献标志码： 文章编号： （ ） Ｏ６５２．１ Ａ １０００５８２Ｘ２０１７０７０９１０８ 　　 犈狀犺犪狀犮犻狀 犕犈犘２犘犪狋犺狑犪 狅犳犈．犮狅犾犻狋狅犘狉狅犱狌犮犲狋犪狓狅犾狉犲犮狌狉狊狅狉 犵 狔 狆 ， 犎犝犃犖犌犡犻犪狅犫犻狀 犣犎犗犖犌犔犲犻犾犲犻 （ ， ， ， ） ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｃｈｏｎ ｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ Ｃｈｏｎ ｉｎ ４０００４４ Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ