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3690例乙肝血清五项指标复检结果研究
3690例乙肝血清五项指标复检结果研究[关键词]乙肝;血清标志物;复检
[中图分类号]R446 [文献标识码]B[文章编号]1673-7210(2007)04(c)-104-01
乙肝病毒表面抗原及其抗体 (HBsAg、HBsAb)、乙肝病毒e抗原及其抗体(HBeAg 、HBeAb) 、乙肝病毒核心抗体(HBcAb)5 项指标是判断乙肝病毒(HBV) 感染和复制程度、传染性强弱以及肌体对 HBV 的免疫力、乙肝疫苗免疫接种效果的实验室乙肝检测指标。目前临床常用检测方法为酶联免疫吸附试验(ELISA), 其具有灵敏度高、特异性好的特点。但由于操作过程中的各个环节对试验的检测结果影响较大,极易导致假阳性或假阴性的结果,为此我们对日常工作中出现的可疑结果采用双试剂复检,用以判断是少见模式还是操作误差,并分析其形成原因。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 对象 本院 2005年1月-2006年2月门诊及住院乙肝检测标本。
1.1.2 试剂 采用上海科华试剂有限公司提供的乙肝五项试剂。
1.1.3 仪器 芬兰产 Multiskan MK3 酶标仪、芬兰产 Multiskan MK2 洗扳机。
1.2 方法
按试剂说明和《全国临床检验操作规程》要求正规操作[l]。对检测出的可疑结果用另一种试剂进行复检。
复检范围及方法 : 单独HBsAg、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性及 HBsAb-HBeAb、HBsAb-HBcAb阳性的标本;HBeAb-HBcAb和HBeAg-HBcAb 两项阳性而 HBsAg 阴性的标本,将血清稀释后复检HBsAg;HBsAg-HBcAb阳性标 本,将血清稀释后复检 HBeAg、HBeAb;HBsAg-HBeAg阳性标本,降低血清稀释倍数复检HBcAb。
2 结果
2.1 3 690例标本共复查341例
2.2 各种复查标本复查结果不符情况
①当日标本复查 129 例,占当总复检标本数的27.8%;其中复检符合标本20例( 占 15.5%)。
②HBsAg稀释后复检共检出8例,占HBsAg复查总数的8.5%。
③HBsAg-HBcAb 阳性标本,HBeAg 稀释后复检阳性2例,占4.34%;抗-HBe复查阳性7例,占15.22% 。
④ HBsAg-HBeAg 阳性标本,降低稀释倍数HBcAb复查阳性5例,占13.51%。
⑤ 经过双试剂复检共检出少见模式45例,占总检测例数的13.20%。主要表现为HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HBsAg-HBeAg、HBsAg-HBcAb、HBeAg-HBcAb 阳性等。
3 讨论
HBV 五项ELISA 法检测过程中受诸多因素干扰,如孔间污染、洗板不彻底、加样错误、操作不规范等,可通过加强质量控制、规范操作程序减少影响;而如试剂盒、标本、操作环境等一些不可控因素,则较难控制。加之,拉米夫定使用后HBV出项基因变异后血清上表现为一些特殊的少见模式,为检测结果的判断带来不便,因此我们在日常工作中对可疑结果采用双试剂复检。
上述结果可见当日标本复检在复检标本中占较大比例,多表现为HBsAg、HBeAg阳性,OD值多在0.2~0.4 范围,复检后为阴性。这可能是当日抽取的标本立即送检,血清分离不好即进行检测所致。因此针对立即送检的标本最好是将标本自然放置1~2 h后,3 000 r/min离心15 min后再进行检测。
双试剂复检我们发现常出现两种试剂结果不符合的情况,主要表现在HBeAb、HBcAb两项,这可能与各试剂厂家试剂盒敏感性不同及HBeAb、HBcAb 两项方法学不同有关。因此采用双试剂可以减少由于试剂盒敏感性原因造成的漏检,同时我们在工作中应加强室内、室间质控,对试剂盒进行正确的评价。
HBeAg-HBcAb、HBAb-HBcAb阳性的标本,应将血清稀释后重复检测HBsAb;HBsAg-HBcAb阳性的标本,应血清稀释后重复检测HBeAg、HBeAb,从而排除带现象造成HBsAg、HBeAg、HBeAb的漏检;HBsAg-HBeAg阳性的标本,应降低稀释倍数重复检测 HBcAb,从而减少由于血清稀释倍数过高,造成低浓度的HBcAb的漏检[2]。
在实际工作中我们应严格按照操作步骤进行操作,对有疑义的检测结果应进行双试剂复检,保证检测质量,排除操作误差、偶然误差、试剂盒差异对检测结果的影响,并正确认识乙肝检测中的少见模式,减少结果误差,为临床提供可靠有用的结果。
[参考文献]
[1]叶应妩,王毓三 .全国临床检验操作规程[M].第2版.南京:东南大学出版社,1997.339-341.
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