常见杀鼠剂中敌鼠钠、毒鼠强快速检验方法.doc

常见杀鼠剂中敌鼠钠、毒鼠强快速检验方法[摘要] 目的：建立一种简便、快捷、普及性强的敌鼠钠、毒鼠强检验方法。方法：先通过定性确认试验后，薄层层析法进一步定性定量敌鼠钠；比色法进一步定性定量毒鼠强。结果：薄层层析法测定敌鼠钠最低检出限为1 μg/ml，比色法测定毒鼠强的最低检出限为0.1 μg/ml。结论：此方法操作简便，灵敏度达到测定要求，结果可靠，可应用于食物中毒样品的快速检验。 [关键词] 杀鼠剂；敌鼠钠；毒鼠强；检验 [中图分类号] R979.8 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）02（a）-080-02 杀鼠剂是用于控制鼠害的一类农药，据有关报道，在市售的常见杀鼠剂中，敌鼠钠、毒鼠强占70%。其中，敌鼠钠是目前普遍使用的一种新型抗凝血杀鼠剂，毒鼠强是剧毒、国家明令禁止使用的，其无特效解毒剂，对人、畜危险性极大。当前鼠药市场混乱，误食中毒事故屡有发生，杀鼠剂的检测对于临床中毒的诊断与抢救、中毒事件的性质判断具有重要的意义。故建立一种简便、快捷、普及性强的检验方法是非常必要的。 1 样品前处理 取10 g可疑样品，用50~100 ml丙酮分多次提取，上下反复振摇50次以上，静置后用滤纸过滤，如果滤液浑浊，必须换新滤纸重新过滤。提取后的丙酮溶液滤入烧杯中，将烧杯置于沸水浴中挥至快干时，转移到小试管中挥干，加入5 ml丙酮溶解残渣，待检。 2 敌鼠钠的快速检验 2.1 原理 敌鼠钠与盐酸羟胺发生反应，缩合生成肟而出现白色混浊，可初步确认敌鼠钠的存在，需经薄层层析法进一步定性定量分析。 2.2 仪器与试剂 硅胶G薄层板。展开剂：正己烷-甲醇-甲酸（5∶5∶0.2）；5%三氯化铁溶液；20%盐酸羟胺溶液；敌鼠钠标准溶液（精密称取敌鼠钠1.000 g，于1 000 ml容量瓶中用丙酮溶解，并稀释至刻度，此溶液为每1.00 ml含敌鼠钠1.00 mg）。 2.3 操作步骤 2.3.1 定性试验先在白瓷蒸发皿中加一滴5%三氯化铁溶液，然后再加一滴待检液，如显血红色则含有敌鼠钠。 2.3.2 确认实验吸取待检液1.0 ml置于小试管中，加入20%盐酸羟胺溶液数滴，如出现白色混浊则含敌鼠钠。 2.3.3薄层层析法定性定量测定[1]分别吸取标准溶液0、10、12、14、16、18、20 μl及待检液20 μl，点于硅胶G薄层板上，边点边用冷风吹干；将薄层板置正己烷-甲醇-甲酸（5∶5∶0.2）展开剂中，展开至溶剂前沿距原点10 cm处，挥干溶剂。结果判断：在薄层板上距原点7 cm处，样品出现红棕色斑点。与标准比较来进行定性及定量。 3 毒鼠强的快速检验 3.1 原理 毒鼠强利用分解剂硫酸分解，其分解产物在一定条件下与变色酸作用，根据颜色反应进行定性，根据反应颜色深浅不同进行定量。 3.2 仪器与试剂 721型分光光度计；水浴箱；控温电炉；硅胶G薄层板。展开剂：丙酮-乙酸乙酯(4∶1)；浓硫酸；30％硫酸；2％变色酸；25%过氯酸。毒鼠强标准储备液（以苯作溶剂配制每1.00 ml含0.10 mg毒鼠强的标准储备液）；毒鼠强标准应用溶液（取储备液以苯稀释成每1.00 ml含10 μg毒鼠强的标准应用液）。 3.3 操作步骤 3.3.1 定性试验吸取待检液1 ml，加入30％硫酸0.5 ml，置85℃水浴5 min，冷却后沿试管壁小心加水0.5 ml，再加2％变色酸溶液0.1 ml，充分混匀，然后加浓硫酸溶液1.0 ml，摇匀。置沸水浴15 min，观察试液变化，同时作空白和阳性对照。结果判断：阳性反应溶液呈淡紫红色~深紫红色，阴性呈淡黄色。 3.3.2 确认试验取硅胶G作担体，以丙酮-乙酸乙酯(4∶1)为展开剂展开，以25％过氯酸显色呈褐色斑点为含毒鼠强。 3.3.3 比色法定性定量测定[2]分别吸取毒鼠强标准应用溶液0.00、0.05、0.10、0.30、0.50、0.70 ml和待检液1.0 ml，置10 ml比色管中，经挥干后各加30％硫酸1.0 ml，加塞，于85℃水浴5 min分解，冷却后沿试管壁加水稀释至2.50 ml，再加变色酸显色剂0.2 ml，轻轻颠倒混匀，加浓硫酸2.5 ml，加塞，置100℃水浴30 min，以流水冷却至室温，以1 cm比色皿在573 nm波长处比色，以毒鼠强含量对吸光度作图，绘制标准曲线，进行定量分析。 4 讨论 此方法具有操作简便、快速的特点，薄层层析法测定敌鼠钠最低检出限为1 μg/ml，比色法测定毒鼠强的最低检出限为0.1 μg/ml，可应用于食物中毒样品的快速检验。因目前无国家标准分析方法，对重要案件的处理要慎重，应采用气相或