气相色谱及质谱联用技术在生物药剂学探究中应用.doc

气相色谱及质谱联用技术在生物药剂学探究中应用[摘要] 气相色谱和质谱联用仪（GC-MS）是开发最早的色谱联用仪器，气-质联用法综合了气相色谱和质谱的优点，可同时完成待测组分的分离和鉴定，是目前能够为皮克级试样提供结构信息的工具，GC-MS法现已广泛用于药物滥用监测、兴奋剂检测、临床疾病诊断和药动学研究等体内药物的分析。 [关键词] 气相色谱和质谱联用技术；生物药剂学研究；应用 [中图分类号] Q657.63[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2009）01（b）-007－０2 在色谱联用仪中，气相色谱和质谱联用仪（GC-MS）是开发最早的色谱联用仪器，自1957年霍姆斯（Holmes JC）和莫雷尔（Morrell FA）首次实现气相色谱和质谱联用以后，这一技术得到长足的发展。由于从气相色谱柱分离后的样品呈气态，流动相也是气体，与质谱的进样要求相匹配，最容易将这两种仪器联用，而且气-质联用法综合了气相色谱和质谱的优点，弥补了各自的缺陷，因而具有灵敏度高、分析速度快和鉴别能力强的特点，可同时完成待测组分的分离和鉴定，特别适用于多组分混合物中未知组分的定性和定量分析，判断化合物的分子结构，准确地测定化合物的分子量，是目前能够为皮克级试样提供结构信息的工具，故可用于测定生物样品和体液中药物和代谢物的痕量分析。对挥发性成分可直接进行定性和定量分析，对不挥发性成分和热不稳定的物质，可进行适宜的衍生化再进行分析。GC-MS法现已广泛用于药物滥用监测、兴奋剂检测、临床疾病诊断、药动学研究等体内药物分析。 1 GC-MS在兴奋剂检测中的应用 根据国际奥委会医学委员会的要求，体育运动中的兴奋剂检测唯一能用作确认的仪器是GC-MS。一般兴奋剂检测实验室都以GC-MS（HP5970/71/72/73）做初筛。初筛一般用选择离子检测（SIM）能有较高的灵敏度，初筛有怀疑的样品必须重新进行检测，并用样品与同样条件下比对物全扫描提供的质谱图的一致性、保留时间的一致性对检测物质进行定性。环丁甲羟氢吗啡（Nalbunbine，NA）是豆种强效的麻醉镇痛剂，它与吗啡的镇痛强度相似，但作用时间较长。在体育竞赛中，运动员利用它减轻受伤后的痛感并产生心理亢奋，提高运动成绩，所以被国际奥委会(IOC)禁用。申利等[1]将丁甲羟氢吗啡阳性尿经酸解、醚洗、乙酸乙酯-异丙醇提取、衍生化后，采用GC-MS分析，检出了环丁甲羟氢吗啡及其一种代谢物，提供了从人尿中检测NA原形药物及其主要代谢物的快速灵敏准确的方法。喷布洛尔(Penbutolol，PEN)是1994年新列入国际奥委会禁用药物的一种β-受体阻断剂，对其分析和检测已有报道[3-5]，但所建立的方法仅限于原形[2]或一、两种代谢物[3，4]。段宏瑾等[5，6]采用气相色谱-质谱联用系统对此药进行了研究。实验发现，PEN原药在尿中的代谢很快，2 h后的尿中已检测不到，因而检测其代谢物十分重要。在实验中共检出了6种代谢产物，其中5种在72 h的尿中仍能检出，大大增加了检测的可靠性。与此同时，还建立了血中PEN的检测方法。此方法现已用于对运动员兴奋剂的检查。张亦农等[7]应用GC-MS方法建立了人尿中类固醇类药物美保龙（Mibolerone）及其代谢产物的监测方法，根据甾体在人体内代谢的一般规律和对质谱图的分析，在受试者的尿液中，确认检出美保龙原形和6种代谢产物，并测定了它们的代谢消除曲线。 2 GC-MS在生物利用度和药代动力学研究中的应用 杨丽莉等[8]以樟脑为内标，建立了GC-MS法测定冰片和川芎嗪的血药浓度方法，最低检出限为2 ng/ml。动物实验表明，冰片可促进川芎嗪的吸收，通过测定10名健康志愿者含服速效救心丸后冰片的血药浓度，并拟合了药代动力学参数，发现舌下含服速效救心丸后10 min冰片达到了最高血药浓度；同时发现冰片在体内的消除半衰期为（58.23±15.90） min，在服药90 min后，冰片浓度降至20 ng/ml以下，从而了解了药物在体内的吸收代谢情况，为合理用药提供了科学依据。另外，以麻黄碱为内标，通过三氟醋酐衍生化，采用高效毛细管GC法用GC-MS分离和质量选择检测器（GC-MSD）测定了血中的伪麻黄碱的含量。方法灵敏，无干扰，适用于麻黄碱类生物碱的分析，也已成功地用于麻黄碱控释片的生物利用度和药代动力学的研究[9]。叶云鹏[10]用气相层析-质谱研究了人体尿中的川芎嗪代谢产物，采用气相层析-质谱(美国惠普公司的HP5890Ⅱ GC-HP5971AMSD)和HP-l石英毛细管柱(12m)。柱温70℃，2.5 min以后以20 ℃/min程序升温至240℃，进样口温度250℃，GC-MS接口温度280℃，载气为氦气，化学电离（chemical