盆炎净浓缩丸中芍药苷HPLC测定.doc

盆炎净浓缩丸中芍药苷HPLC测定[摘要]目的：建立盆炎净浓缩丸中芍药苷的含量测定方法。方法：HPLC法，流动相∶乙腈-0.1%磷酸溶液(13∶87)；检测波长为230 nm；柱温40℃。结果：芍药苷线性范围为0.12～1.30 μg,平均回收率101.0%,RSD为2.57%。结论：方法可靠，简单可行，为控制盆炎净浓缩丸的内在质量提供了科学依据。 [关键词]盆炎净浓缩丸；芍药苷；高效液相色谱法 [中图分类号]R284[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2007）02（b）-030-02 盆炎净浓缩丸收载于部颁标准上（标准号WS3-B-2387-97），由忍冬藤及赤芍等八味中药组成，具有清热利湿，和血通络，调经止带之功效，用于湿热下注，白带过多，盆腔炎见以上的证候者。原标准只有简单的试管反应及薄层鉴别项，无含量测定项目。因芍药苷为槐花中主要有效成分，且与本品的功能主治基本吻合，为了确保药品质量，使临床疗效稳定可靠，我们以高效液相色谱法测定了芍药苷的含量，为控制其内在质量提供了科学依据。 1 仪器与试药 岛津LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外可见检测器；日立Ｕ－3400型分光光度计；芍药苷对照品，由中国药品生物制品检定所购入（供含量测定用,批号：0736-200014）；盆炎净浓缩丸，自制；所用试剂乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 Shim-pack VP-ODS（150 L×4.6）色谱柱，以乙腈-0.4%磷酸溶液（13∶87）为流动相；检测波长为230 nm；柱温40℃。理论板数按芍药苷峰计算，应不低于3000。在此条件下，芍药苷和样品中的其他物质可以得到良好的分离，而阴性液无干扰。 芍药苷对照品、样品及阴性液（取处方中除去赤芍以外的其他药材，同成品制备方法制成盆炎净浓缩丸，并用样品供试液制法制成阴性液）的HPLC图，见图1。 2.2 线性关系的考察 精密称取芍药苷对照品3.20 mg，置25 ml量瓶中，加50%甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 精密吸取对照品溶液0.1 ml、0.3 ml、0.5 ml、0.7 ml、1.1 ml、1.3 ml，分别置2 ml量瓶中，加50%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为系列对照品溶液。分别吸取上述6份对照品溶液各10 μl，按2.1 的色谱条件测定。以进样量(μg)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线，回归方程为Y= -8134+1289243X，r=0.9996， 结果表明, 芍药苷在0.064～0.832 μg范围内呈现良好的线性关系。 2.3 供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.15 g，精密称定，置50 ml量瓶中，加水40 ml及浓盐酸1 ml，超声处理（功率120 W，频率40 kHz）30 min，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，静置，取上清液10 ml，移置分液漏斗中，用三氯甲烷振摇提取2次，每次10 ml，分取水液，置10 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 2.4 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液10 μl,在上述同一色谱条件下,连续进样5次,测定RSD=1.8%（n=6），证明精密度良好。 2.5 稳定性试验 精密吸取供试品溶液在0、2、4、6、8 h分别进样，进行测定，RSD=0.91%，可见供试品溶液中齐墩果酸在8 h内含量稳定。 2.6 重复性试验 分别称取本品同一批号样品6份，按供试品溶液制备方法制备，依法进样测定，RSD=2.04%（n=6）,说明本方法重现性良好。 2.7 回收率试验 在已知含量的成品粉末中,分别定量加入芍药苷对照品溶液1 ml，依含量测定项下方法操作，进样测定（加标供试液进样5 μl），平均回收率为101.0%，且RSD 1