精脒对CAOV3卵巢癌细胞端粒酶活性影响.docVIP

精脒对CAOV3卵巢癌细胞端粒酶活性影响【摘要】目的：探讨精脒对CAOV3卵巢癌细胞的生长和端粒酶活性的影响。方法：应用MTT法观察精脒对CAOV3卵巢癌细胞生长的影响，应用TRAP-银染色法检测精脒对CAOV3卵巢癌细胞端粒酶活性的影响。结果：在细胞培养过程中，外源性增加精脒浓度可使细胞生长速度加快。用不同浓度精脒室温处理的CAOV3细胞端粒酶提取液2小时后，端粒酶活性与对照组差异无显著性。CAOV3细胞经不同浓度精脒处理3天后的端粒酶活性与对照组相比明显增高。结论：精脒浓度的升高可引起端粒酶活性的增高，精脒引起的细胞增殖与端粒酶活性增高有关。 【关键词】端粒酶；精脒；TRAP；卵巢癌 文章编号：1009-5519（2007）15-2223-03 中图分类号：R33 文献标识码：A Effect of spermidine on telomerase activity of CAOV3 cells LIU Kun1，YAO Yang1，YU Cheng-guo2 （1.Department of Physiology，Shenyang Medical College， Shenyang 110034，China;2.Department of experimental equipment， China Medical University,Shenyang ，China） 【Abstract】Objective: To explore the effect of spermidine on the cell growth and the telomerase activity in CAOV3 cells. Methods: MTT assay was used to detect the effects of spermidine， and TRAP method was used to detect the telomerase activity in spermidine treating CAOV3 cells.Results:During cell growth， increase exogenous spermidine resulted in the increase rate of cell proliferation. Telomerase activity of CAOV3 cells’ telomerase extraction treated with spermidine for 2 hours had no significant difference from the control group. Telomerase activity of CAVO3 cells treated with spermidine for 3 days significantly increased compared to the control group. Conclusion: Telomerase activity increased with the increasing of spermidine levels. Spermidine inducing cell proliferation was related to the telomerase activity increasing. 【Key words】Telomerase；Spermidine；TRAP；Ovarian cancer 多胺是一类广泛存在于生物体内天然脂肪族多价正离子，包括腐胺、精脒和精胺， 与细胞的增殖、分化、再生和肿瘤的恶化密切相关[1]。多胺不仅能促进正常细胞的生长，而且对恶性肿瘤细胞的增殖和转移起到促进作用。 端粒是真核生物线状染色体一种特殊结构，由一简单重复G的DNA序列及蛋白组成，人和各种脊椎动物端粒DNA序列均为（TTAGGG）n，端粒随细胞分裂而不断缩短至一定程度时，细胞将停止分裂，进入老化期，甚至死亡。因此，端粒在细胞衰老和肿瘤增殖中有重要作用。端粒酶的激活被认为是恶性肿瘤发生学上的一个共同途径[2]。端粒酶的活性受到各种因素的调节，多胺是否也是通过端粒酶激活这条途径而引起细胞增殖及肿瘤恶化的，是我们的研究所要解决的问题。 1 材料与方法 1.1 材料：CAOV3细胞系来源于中国医大细胞生物学实验室；PCR Kit；PBR322/HAVⅢ DNA mark（TaKaRa 公司）；二甲基亚砜(DMSO)；精脒（Sigma公司）；RPMI-1640培养基；小牛血清；引物：TS AAT CCG TCGAGCAGAGTT，CX CCCTTA CCCTT