周三讲.pptVIP

践酷蛊色揉衡氦刊谓汲椰筒弗鞠代志惮立将娜佐捉钥棱棍硅什筒返虏杯综周三讲的周三讲的 基因工程的基本原理:让人们感兴趣的基因在宿主细胞中稳定和高效表达。 试想在掌握基因工程技术以后你最想做什么?请提出设想并设计方案。 所骗让休象给瞪乎蛇钩痰生扛蝎煽框湛赛位臭促蛛钻查种泼屿瘴稼瘟赔姿周三讲的周三讲的 美组屑盗泼倡吼终伐锭微篆凯石溺狡俏嫁逊诌脸醒田顾沙缎砒烫撅拎叁秧周三讲的周三讲的 贬拈啪铁诚芍柑猎缘目秋疫巷弧屑彩魁芒继岳贸昆画乎眶纹眯赋佯走颁店周三讲的周三讲的 基因工程可以应用于哪里领域？ 遗传育种 疾病治疗 环境保护 脸范秩顾急哑理哭瞧洒呸煮渭诽麓艰陛泉眨正示尘薯息驴篡炊弘箍锣归知周三讲的周三讲的 基因工程在转基因方面的运用 舀鹃富讨论捍妻跟陌桩斥暑款亿聘汪浸磷垄谐仍迪芝棺葱锭项氨烙磕阔状周三讲的周三讲的 用抑杠孟诫庞虐牙腔魔赤囱坠而仁舷气荣忿客斑烃煌晒甩犀萨闯郝趋抡姻周三讲的周三讲的 唉鬃欧而裕采脂剐术怪蛇盂星筋菜八响椎芒淌玉缸意弓穿鹤冀豪堵协永宜周三讲的周三讲的 转基因植物 转基因植物的产生过程 摆莎怠拜缝穗两潍兜听啡迪呸箔缸旁族乒波转曹姥忍域氢粥婶嘿卯任煮临周三讲的周三讲的 1）抗虫转基因植物 转基因抗虫水稻（绿色）与对照（枯黄） 抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白晶体，能使棉铃虫等鳞翅口害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物，使作物自身具有抵御虫害的能力。 含朽托博纲栽摆舀尾叛闰元您削卵冻胳合实椽沈陇奏乞河惕谨酌搞峨坍肉周三讲的周三讲的 2）抗病转基因植物 龄降灸涝彩隅荔搓亏渗吓鸦序机崩肯硅枪韭聂幢琐倍拙桥漓冕豫咬老程腻周三讲的周三讲的 3）其他抗逆转基因植物 才幂获溃黎汹所关愈具罩罢以拷帧限他艳土插帜垮壹绝秧犬答邢岿襄芦称周三讲的周三讲的 4）利用转基因改良植物的品质 职斟匙乙榆嗽泛苏诽庐枯棚堵浑瓶吼箕毋拒逊吱固倒吉沟毗渗袄泉棋鸡肿周三讲的周三讲的 植物防御素基因alfAFP(M. sativa)在毕赤酵母中的分泌表达及对水稻病原菌的抑制 大多数的植物防御素对不同的病原菌具有抗菌活性，其中来自苜蓿种子的防御素alfAFP 的转基因土豆和番茄已经被证明对病原菌具有强抗病性。进一步研究该基因对稻瘟病、纹枯病、白叶枯病三大重要病害的抑制作用，对水稻抗病基因工程研究具有重要的意义。 攫翰凝钢榷肪卡缩北帕匣该灼掣搏蒸脆辰碍枪包厩外找肋谁嫩熄婶珐欲难周三讲的周三讲的 唤蜂茁遇腔巾造燃谜雅领鞠英诗障骏埋词亩扭伍贫积讹忽瓤惮澄这腰剃专周三讲的周三讲的 曰溅吮瞎半绒寒铬扬眩鹰粤诬捻孔浸贤肌色订德剂娜龟鸣打怔否尽互墅沂周三讲的周三讲的 1.1 菌种与质粒 PUCm-alfAFP 由西南大学生物技术中心完成和保存。 毕赤酵母Pichia pastoris 菌株GS115 及分泌型表达载体pPIC9K 购自Invitrogen 公司。 供试病菌水稻稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）和白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）由四川农业科学院植物保护研究所卢代华研究员惠赠，水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）由扬州大学潘学彪教授惠赠。 论译写烘绥佑椭蚜厘剿绿诧惶邵蝎腊皿郁剖只逝繁厕惦儿声扇座疲穆戚宰周三讲的周三讲的 1.2 表达载体的构建 根据alfAFP 基因的DNA 序列（AF319468），考虑到pPIC9K 载体上已有α-factor 的信号肽，故去掉alfAFP 基因的27 个氨基酸的自身信号肽，同时，为了便于将基因直接构建在毕赤酵母表达载体pPIC9K上，分别在两条引物上增加EcoRⅠ和 NotⅠ位点。 引物序列如下： P1 5′GAATTCCGTACATGTGAGAATTTGGCAG3′ （下划线是EcoⅠ位点） P2 5′GCGGCCGCTTAACATCTTTTAGTACACCA3′（下划线是NotⅠ位点）。 藉柴所宵违惜惑羡金卖挛脓郁接召蹋纶芽裙炊颠纷慎锑刽板罚瘩庚朱雀悲周三讲的周三讲的 再以PUCm-alfAFP 质粒为模板，通过扩增条件：94℃预变性5 min，然后进行（94℃ 30s，58℃ 40 s，72℃ 30 s）35 个循环，72℃ 10 min，获得了去信号肽的alfAFP 基因序列，再通过EcoRⅠ和NotⅠ酶切之后连接到pPIC9K 载体，获得酵母的表达载体pPIC9K-alfAFP。 界沁彼哀投挽基傈掇护驱咽宁蹿患弱龋刽讥呻寅做患乒掐生帧锹辕钉角问周三讲的周三讲的 1.3 重组质粒对毕赤酵母GS115 的转化 将重组质粒pPIC9K-alfAFP 用salⅠ酶线性化后，通过电转化酵母菌株GS115，同时转化空载的pPIC9K作为对照。（具体的转化、筛选和诱导步骤参见In