编号：农业微生物研究中心菌种-100815共6页承担单位：福建农.DOC

编号：农业微生物[菌种-100815]，共 6页 承担单位：福建省农科院农业生物资源研究所 试验设计： 试验项目：土样4068中微生物的分离纯化与统计 试验人员：杨莹莹 试验负责：杨莹莹 报告日期：2010-07-15 计数月份：2010年07月 研究资格系数 (0.5-1.0) 实验设计系数 （0.9-1.0） 报告得分 总分 实验设计 实验记载 实验分析 实验简报 实验文章 1-20% 21-40% 41-60% 61-80% 81-100% 1%-5% 设计不足，实施错误 6%-10% 设计不全，实验无果 11%-15% 设计可以，实施不全 16%-20% 设计完整，分布实施 21%-25% 实验不全，记载无果 26%-30% 实验不足，记载不全 31%-35% 独立实验，记载不全 36%-40% 分布实验，记载完整 41%-45% 目的明确，实验完成 46%-50% 实验完整，记载清晰 51%-55% 实验系统，结果可信 56%-60% 实验创新，分析清晰 61%-65% 实验创新，结论清晰 66%-70% 实验完整，统计清晰 71%-75% 实验系统，数据可靠 76%-80% 报告完整，文章雏形 81%-85% 结构合理，分析有据 86%-90% 逻辑清晰，统计合理 91%-95% 图表完整，写作流畅 96%-100% 文献完整，发表水平 福建省农业科学院农业生物资源研究所 农业微生物研究中心 电话: 0591 传真: 05911．试验目的 土壤是微生物生活的大本营，其中含有大量不同类型的微生物，可按照一定的方法将各类微生物通过分离进行纯培养，并能对特定类群进行数量测定。本实验主要目的是了解土壤微生物的分离纯化及测数的基本原理；学习并掌握微生物分离纯化技术方法；学习并掌握微生物平板菌落计数的技术方法。 本实验基本原理是通过稀释使菌体细胞充分分散，单细胞得以生长发育形成菌落，可使用稀释法或平板划线法进一步纯化，还可通过平板菌落计数，推算单位重量土壤样品含有微生物的数量。本实验采用稀释平板法[1]，将纯化培养得到的菌种保存,作为下一步实验的菌种材料。 2．试验方法 2.1材料 NA培养基（）牛肉浸膏3g，酵母浸膏1g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，琼脂18g蒸馏水1000mL，pH 7.琼脂18g，1000mL,0.3g链霉素，pH自然。 高氏一号培养基（分离放线菌）：可溶性淀粉20g，硝酸钾1g，磷酸氢二钾0. 5g，硫酸镁0. 5g，硫酸亚铁0.01g，琼脂18g，蒸馏水1000mL，pH 7.6。 2.1.3无菌水 99ml、9ml无菌水。2.3实验步骤 2.3.1称土 称取土壤1g，稀释在9ml无菌水10-3浓度，依次配制10-4、10-μL至相应标记浓度平板上，溶液滴至平板中央涂布均匀。真菌梯度为10-2、10-3、10-410-4、10-5、10-10-4、10-5、10- 3．试验结果 实验结果如下表所示。其中某些真菌较为常见，所以只选择两株不常见的菌株进行保种。 表1 土壤微生物分离数量 cfu / g）cfu / g）cfu / g）4068 193.5×103 50.0×103 10.0×103 表2 土壤中细菌菌落特征 种类号 菌种编号 菌落特征 数量 4068-1 10131 白色根状，干燥，扁平 3/1/0 4068-2 10132 淡黄色，透明，表面湿润，边缘整齐 3/3/5 4068-3 10133 白色，不透明，湿润，边缘整齐，稍凸 14/12/10 4068-4 10134 白色，不透明，干燥，边缘整齐，扁平 2/7/2 4068-5 10135 白色，不透明，边缘不整齐有褶皱，扁平，较大 10/16/13 4068-6 10136 白色，不透明，辐射状褶皱，扁平 5/4/2 4068-7 10137 白色，不透明，有粘稠感，表面同心圆样凸起 2/0/1 4068-8 10138 白色，不透明，干燥，脐状凸起 0/0/1 表3 土壤中真菌菌落特征 种类号 菌种编号 菌落特征 数量 4068-1 草绿色孢子，背面灰白带绿 2/1/4 4068-2 边缘白色，中心墨绿色，结构较紧实，背面棕黄色 9/4/4 4068-3 9388 绒毛状，白色带粉色，背面乳白色 1/0/0 4068-4 边缘白色，中心墨绿色，有辐射状褶皱，背面灰白 0/1/0 4068-5 边缘白色，中心墨绿色，背面白色 0/0/1 4068-6 边缘白色，中心墨绿，有褶皱，背面粉红色 0/1/1 4068-7 9389 白色，较小，边缘规则，结构较紧 0/1/0 表4 土壤中放线菌菌落特征 种类号 菌种编号 菌落特征 数量 4068-1 9401