小鼠骨髓源性内皮祖细胞的分离培养与鉴定_李美玲.pdf

CN43-1262 /R　 2011 19 6 465 []　1007 -3949 (20 11)19-06-0465-05 · · 小鼠骨髓源性内皮祖细胞的分离培养与鉴定 , , 　 (中南大学湘雅二医院心内科, 湖南省长沙市 4 100 11) []　内皮祖细胞;　骨髓;　小鼠 [　]　　建立 一种高效、 定的从小鼠骨髓中分离培养与定向诱导分化内皮祖细胞的方法。 　通过 密度梯度离心法从小鼠骨髓中分离单 个核细胞, 经差速贴壁结合特殊培养基扩增, 诱导分化为内皮祖细胞。应用 流式细胞技术鉴定内皮细胞系列标志:CD34、CD31、Flk-1和祖细胞标志 CD133。　经密度梯度离心和差速贴 壁法分离所得的细胞经 EBM-2专用培养基培养后, 第 4 天可见集落形成, 培养第 12 天流式细胞仪检测其 CD34、 CD133、Flk-1、CD31的阳性率分别为 65% ±4%、48%±3%、37%±3%和 51%±4%。　从小鼠骨髓中分离培 养与定向诱导分化内皮祖细胞的方法效率高, 定性和重复性好。 []　R34 [] 　A Isolation, C ltreandIdentificationofMoseBoneMarrow-derivedEndothelial ProgenitorCells LIMei-Ling, LIUFeng-Jiao, andLIULing (DeparmtentofCardiology, theSecondXiangyaHospitalofCentralSothUniversity, Changsha, Hnan410011, China) [ KEYWORDS]　EndothelialProgenitorCells;　BoneMarrow;　Mose [ ABSTRACT]　　Ami　Toestablishanefficientandstablemethodforisolation, cltreanddirectionaldifferentiation ofendothelialprogenitorcellsfrommosebonemarrow.　　Methods　Mononclearcellswereisolatedfrommosebone marrowbydensitygradientcentrifgationanddifferentialadhesionmethod.Theremainingcellswerecltredanddifferen- tiatedtoendothelialprogenitorcellsinEBM-2.Theexpressionsofspecificantigens(CD34, CD133, Flk-1 andCD31)on cellsrfacewereanalyzedbyflowcytomete.r　　Reslts　Cellswereobtainedfrommosebonemarrowbydensitygrad-i + entcentrifgationanddifferentialadhesionmethodformedclstersatday4.Atday12, positiveratiosofCD34 , + + + CD133 , Flk-1 andCD31 were65%±4%, 4 8% ±3%, 37%±3% and51%±4%, respectively.　　Conclsion 　Anefficien,tstableandreplicablemethodforisolationandcltreofendothelialprogenitorcellsfrommosebonemar- rowhasbeenestablished.