端粒酶重复片段扩增试剂盒TRAPKit.PDFVIP

天 CAT#: 111009-50 净 低温运输,-20℃保存 沙 系 列 端粒酶重复片段扩增试剂盒 TRAP Kit 使用手册V1.3 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278 ；电邮：order@ 产品及特点 端粒酶存在于85-90%的肿瘤组织中，因此通过检测端粒酶活性就能早期诊断大多 数肿瘤。目前最常用的检测端粒酶活性的方法就是 TRAP (telomeric repeat amplification protocol ，端粒重复片段扩增) ，它利用端粒酶能在底物DNA 末端添加 不同数量的TTAGGG 序列这一特点，通过PCR 检测延伸产物而高效检测端粒酶活性。 本产品专门用于快速测定人类细胞端粒酶活性。它具有以下特征： 1. 一站式，提供从细胞裂解到PCR 的所有试剂，但不含PAGE 和银染试剂。 2. 一管式操作，端粒酶延伸和PCR 在同一体系中完成，方便快捷。 3. 提供改进的、长为 150bp 的内参和含8 个端粒序列的合成端粒，可有效排除PCR 假阴性。内参长度远大于TRAP 产物，不会干扰结果分析。 4. 改良的TS 模板和PCR 引物，极大降低了引物二聚体的形成。 5. 既可用于培养细胞，也可用于实体组织。 6. 灵敏度高，最低可以检测到 10 个肿瘤细胞中的端粒酶活性。 规格及成分 成 份 编 号 50 次小纸盒包装 TRAP 细胞裂解液 111009A 10 mL PCR Mix 3.0 90805 1.5 mL 合成端粒(PC) yw747 50 uL TS-引物混合物 （含内参） yw741742 300 uL 超纯水 100935 1 mL 使用手册 111009sc 1 份 运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。 自备试剂 PAGE 电泳及银染试剂盒 使用方法 一：端粒酶的提取 注意：端粒酶的组成成分中有RNA ，极容易被降解，因此，应该跟提取RNA 一样，尽 量在低温条件下快速操作、最好使用固相RNase 清除剂 （CAT#:3090）清洁试验台。 1. 对冷冻的实体组织：将50-100 mg冷冻组织在液氮中用预冷的研磨器研磨成粉末， 再转移到预冷的玻璃匀浆器中，加入200 uL 预冷的TRAP 细胞裂解液，温和手 动匀浆数次后冰浴 30 分钟，每间隔数分钟涡旋振荡一次，共 5-6 次，然后直接 进入第3 步操作。为保证裂解效果，可在显微镜下观察。如果组织样品不足50-100 mg ，可以按比例降低TRAP 细胞裂解液的用量。 5 6 2. 对新鲜的培养细胞和组织：用自备的预冷PBS 洗涤 10 - 10 个经过胰酶处理的细