中药分析5-1-生物碱.ppt

第五章 中药制剂中 各类化学成分分析 第一节 生物碱类成分分析 生物碱 *含氮有机化合物，碱性 （二）理化性质 1. 物理性质 （2）形态 多数为结晶型固体 有些小分子的呈液态（菸碱、槟榔碱） 麻黄碱具有挥发性 咖啡因具有升华性 沉淀剂 沉淀颜色 HgI2·2KI BiI3·KI I2-KI H3PO4·12MoO3 苦味酸 4. 显色反应 常用显色剂 硫酸、硝酸、甲醛-硫酸、钒硫酸、 钼硫酸、氯酸钾、三氯化铁、 香草醛、对二甲氨基苯甲醛 分子结构与碱性强弱的关系 （1）氮原子上电子杂化方式的影响 （2）电效应与碱性强弱的关系 电效应（诱导效应和共轭效应） 诱导效应 烷基、甲基、胺基 共轭效应 氮上未共用电子对 *与供电子基团共轭 碱性↑ （3）立体结构与碱性的关系 空间障碍少，易接受质子，碱性↑ 空间障碍多，难接受质子，碱性↓ 7. 旋光性 多数具有旋光性 例 吗啡的鉴别（Marquis反应） 防止斑点拖尾的措施 2. PC法 （ChP应用不多） 固定相 常用新华滤纸 例 小活络丸【鉴别】 四、含量测定 生物碱的定量方法 ，大多是根 据它含有的N原子或双键或分子中官 能团的理化性质而设计的。考虑中药 制剂的复杂性，可采用的方法有 （一）化学方法 适用于生物碱含量高、处方 药味少、内含成分简单的制剂 1. 容量法 A. 酸碱滴定法（水溶液） B. 非水碱量法 B. 非水碱量法 例 苦参片中苦参总碱的含量测定 苦参总碱的含量计算 （1）酸性染料比色法 例 安胃片延胡索中总生物碱的含量测定 （3）雷氏盐比色法 （三）色谱法 2. HPLC法 中药制剂采用HPLC法测定含量，大部分为RP-HPLC法 RP-HPLC法应用于生物碱分析 固定相 硅胶-C4或C8或C18 流动相 甲醇:水或乙腈:水 应注意 固定相Si-OH的复盖率 复盖率越高，分离效果越好 复盖率小，易引起拖尾，解决方法 （1）改进流动相 A. 加抑制剂（三乙胺） D. 加离子对试剂 当生物碱在酸性条件下以阳离子存在 时，离子对试剂的阴离子与之形成中性离 子对，掩蔽了生物碱的碱性基团，使其不 与Si-OH作用 （2）改进固定相 掩蔽Si-OH基 C. 加电解质缓冲液 改变流动相离子强度，稳定pH及促进离子对相互作用 B. 加季铵盐（溴化四甲基胺） 例 舒风定痛丸中士的宁含量测定 流动相 正己烷-二氯甲烷-无水甲醇-三乙胺 47.5 47.5 5 0.4 用过离子对试剂的柱要尽快清洗 （辛烷磺酸钠或十二烷基磺酸钠） 原理： 弱碱性药物碱性非常弱在水溶液中滴定突跃不明显 ，不能在水中直接滴定，但在非水酸溶液中碱性相对增强，使滴定顺利进行可滴定。 溶剂 冰醋酸、冰醋酸+醋酐、醋酐 滴定液 高氯酸液（0.1mol/L） 指示终点方法 电位法 指示剂法 结晶紫 需加醋酸汞以消除干扰 难解离 在冰醋酸中 酸性较强 氢卤酸对非水碱量法有干扰 计算 咖啡因 ChP 【含量测定】精密称取本品0.1423g，加醋酐-冰醋酸（5:1）的混合液25mL，微热使溶解，放冷，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1036mol/L）滴定，至溶液显黄色，消耗高氯酸滴定液（0.1036mol/L）7.09mL；并将滴定结果用空白试验校正，空白试验消耗高氯酸滴定液（0.1036mol/L）0.03mL。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于19.42mg的C8H10N4O2。 2. 重量法 *提取生物碱→蒸干→称重 *生物碱 + 沉淀剂→干燥→称重 沉淀剂重量法 提取重量法 例 昆明山海棠片 ChP 【含量测定】 取本品60片，除去糖衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于25片），置200mL锥形瓶中，加适量硅藻土（每取本品1g，加硅藻土0.2g），混匀，加乙醇70mL，加热回流40分钟，放冷，滤过，滤渣中再加乙醇50mL，加热回流30分钟，放冷，滤过，合并滤液，置水浴上蒸干，残渣加盐酸溶液（1→100）30mL，置水浴上搅拌使溶