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gdf-9和bmp-15在不同品系小鼠中的多态性和-中国试验动物学报
GDF-9和BMP-15在不同品系小鼠中的多态性和生殖能力关联分析
殷昆仑1,2,张长勇2,王天奇2,暴国2,付淑霞2,何嘉玲2,孙德明2
(1.北京协和医学院研究生院,北京 100730;2.国家人口计生委科学技术研究所,北京 100081)
【摘要】目的 研究GDF-9和BMP-15在繁殖能力不同的品系小鼠ICR和BALB/c中的多态性,为筛选相关的模型动物种群提供参考资料。方法 采用直接测序法筛查多态性位点,并对多态性位点构建双荧光素酶报告基因载体,检测5’UTR对下游基因的影响。结果 ICR小鼠的产仔数是BALB/c的2.8倍左右;在ICR和BALB/c之间发现了GDF-9存在三个多态性位点,一个位于5’端的非编码区,另外两个位于蛋白编码区;双荧光素酶检测结果显示GDF-9的5’UTR区可以促进下游基因的表达。BMP15在两种品系中不存在差异性位点。结论 GDF-9在ICR和BALB/c这两个品系小鼠中存在多态性位点,这些位点的变化对下游基因的表达起一定的促进作用。BMP15在ICR和BALB/c小鼠中不存在多态性位点。
【关键词】GDF-9;BMP-15;小鼠;繁殖力;基因多态性;作用机制
Polymorphism identification in mice GDF9 andBMP15 genes and their association analysis with litter size
Yin Kun-lun1,2,Zhang Chang-yong2,Wang Tian-qi2,Fu Shu-xia2,Sun De-ming1,2
(1. Graduate School,Peking Union Medical College, Beijing 100730, China;2. National Research Institute for Family Planning, Beijing 100081, China)
【Abstract】Objective To study the polymorphism of GDF-9 and BMP-15 in mice of different strains, different reproductive capacity, for screening related model animal population provide reference material.. Methods Screening polymorphism loci by using direct sequencing method, and testing 5 UTR impact on downstream genes by constructing luciferase dual reporter vector. Result ICR mice litter size is about 2.8 times the BALB/c; In ICR and BALB/c, respectively, found three polymorphisms, one at the 5 end of the non-coding region, the other two located in the protein coding region ; Dual-luciferase test results show that the 5UTR area of GDF-9 can promote the expression of the downstream gene. BMP15 in two strains are not present in the difference site .Conclusions GDF-9 polymorphic loci exist in ICR and BALB/c strains, changes in these sites play a certain role in promoting the expression of the downstream gene.
【Key words】 GDF-9; BMP-15; mice; fecundity; gene polymorphism; mechanism
生长分化因子9 (growth differentiation factor 9,GDF-9) 和骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP-15)是由卵母细胞分泌的两种生长因子,对哺乳动物的正常生殖能力是不可或缺的[1]。GDF-9和BMP-15均属于转录生长因子β(Transformin
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