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二、提高牛胚胎移植效益的操作方案 提高牛胚胎移植的规模化、商业化运作的经济效益，不仅仅依靠胚胎的生产和移植技术水平的提高，还需制订系列的操作方案。要从供体牛的选择与处理、提高胚胎生产效率、提高移植受胎率、降低胚胎生产成本和受体牛成本等方面，分析制订提高牛胚胎移植效益的操作方案。 1、供体牛的选择及处理方案 （1）供体牛的选择方案 严格选择供体牛。尤其是繁殖系统的健康状况。泌乳高峰期的奶牛，处于营养负平衡状态，对超排激素的反应不敏感，还可能与高蛋白日粮有关，超排效果往往不是很理想，不能作为供体选择。 利用育成母牛生产胚胎。母牛的初配年龄一般比性成熟晚4至7个月，以体重达到成年体重的70％时为宜。利用这一阶段，可以安排两次体内胚胎的生产，一般不会影响正常的配种程序。 利用遗传性能好但产奶性能较差的牛生产胚胎。如因乳房炎而淘汰的病牛约占总淘汰率的10%，可以作为供体牛使用，降低胚胎生产成本。 （2）对供体牛进行营养调控 供体的营养状况直接影响胚胎的质量和数量。营养供应量能够影响牛卵泡的生长和卵母细胞的质量和数量，因此，制订统一的饲养规程有助于得到大量均衡一致的优质胚胎。日粮配方能够显著改变体内尿素和氨的循环水平，而且，瘤胃中可降解氮的过剩或营养失调能引起胚胎成活力下降，因此，应选择一种不会产生过量瘤胃氨的日粮，从而避免卵泡内卵母细胞接触高浓度的有杀伤力的细胞毒素。 （3）供体牛子宫的净化处理和隐性子宫炎的检测 由于患隐性子宫内膜炎的母牛常不表现临床症状，直肠检查及阴道检查也不容易发现异常变化，发情周期正常，发情时子宫排出的分泌物较多，有时分泌物略微浑浊。对初步选择的供体牛要进行普遍的子宫净化。进行同期发情后，进行隐性子宫炎的检测，呈阳性的不能作为供体。 2、提高体内胚胎生产效率的操作技巧 （1）冲胚之前抽取子宫颈粘液 在冲胚胎时，如果子宫颈粘液或血凝块粘堵在冲胚管出水孔处，使冲胚液积在子宫内排不出导致冲胚失败。在子宫内充满积液的情况下，再注入冲胚液，还会导致冲胚液从输卵管冲出，对输卵管造成损伤。在冲胚前对母牛子宫颈的粘液抽取，一是减少粘液堵塞冲胚管造成的冲胚液回流不畅，从而提高胚胎的回收率；二是可以保证冲胚时冲出的溶液清亮透明利于检胚。 （2）及时消除直肠空洞造成的操作障碍 在进行冲胚和移胚时，发生直肠充气是一种较为常见的现象。由于手术前打了麻药后，直肠灵敏度降低，根本不能自行排气，在有空气进入直肠时容易造成直肠充气，形成空洞。此时，导致直肠壁很硬，不能准确把握子宫，无法继续工作，这时就需要用牛直肠抽气装置进行人工排气。 （3）制订细致的操作规范 在制订各项操作规范的时候，要准确到位，可操作性强，并强调注意事项，以免造成不必要的损失，尤其要注意以下事项： ①超排药品的使用剂量要准确。当用量过大时，不但影响胚胎生产的数量，还会影响胚胎的质量。 ②输精的次数要适当。超排供体牛输精并非次数越多越好，因为精液是由蛋白质组成的，本身就是一种抗原，输进母牛体内以后必然激发其产生抗体，来排除这些异物。多输精1次就增加1倍的抗体量，所以在正常情况下以输精2次为宜，输精间隔时间10～12小时。 ③配种时严禁用手触摸卵巢。检查超排效果不能在输精时去摸卵巢的卵泡来判定，而是在冲胚前（或前一天）直肠检查牛的卵巢黄体个数来确定。 ④冲胚液的量要把握好。尤其是第一次冲胚液的量要把握好，如果量太大，会将胚胎及液体从输卵管冲出，冲胚无法进行，也会造成输卵管的损伤。 3、利用活体采卵技术进行胚胎的工厂化生产 活体采卵间隔时间的安排。母牛每周采卵1～2次。可间隔3～4天进行连续的采卵，对于正常母牛，无需使用激素；但是当母牛采卵数少于6个时，可用外源激素进行适当调节,通常的做法是每14天使用一次外源激素。每周两次的卵子收集要比间断性的采卵效率高，连续采卵会提高母牛的采卵数量与质量。 种公牛冻精的选择。先用提前鉴定的公牛精液与从屠宰场收集的卵子进行实验，用这种方法来判断精液是否可以成功受精，是否可以产生优质胚胎。这一步非常重要，因为人工授精良好的公牛精液不一定在体外受精时也表现良好。 活体采卵操作 卵丘-卵母细胞复合体 体外受精胚胎 4、提高移植受胎率的操作方案 （1）合理安排受体牛的移植程序 根据发情时间确定受体移植顺序。在进行大批量的胚胎移植时，需要根据受体牛发情、排卵时间的先后进行排序，发情、排卵早的先选，发情、排卵晚的后选，尽量缩小受体与供体的发情同步差，最长不超过±24小时。 根据胚胎的发育阶段选择受体。同一时间处理的供体牛，甚至同一供体牛，胚胎的发育阶段不尽相同，在选择受体牛时，还要根据胚胎的不同发育阶段和受体牛的不同发情、排卵时间灵活搭配，尽量缩短胚胎发育阶段和受体牛子宫环境的同步差。 （2）严格执行移植操作程序 移植胚胎时要严格