福建农科院生物技术中心农业环保技术研究室-yzxzcom.pdf

编号： 农环组菌字 [2005-04-23], 共 4 页 承担单位：福建省农科院生物技术中心 课题编号：2002AA244031 课题名称：促生、抗逆、防治病虫的多功能生化-生物制剂的研制与应用 课题负责：陈靠山 子课题名：设施蔬菜病虫生物-化学协同控制技术研究 子课题号：2002AA244031-2 子课题人：刘波、郑伟文 子项目名： 项目主持： 子项目-2：2002AA244031-2-n 试验项目：3株蜡蚧轮枝菌的胞外代谢产物对蚜虫的毒性试验 试验人员：葛慈斌 王联德 试验负责：葛慈斌 报告日期：2005 年 4 月 23 日 计数月份：2005.4（2） 福建省农科院生物技术中心 农业环保技术 研究室 电话: 7835334, 传真: 7809378 第 ２ 页 共 5 页 试验报告 ２ 1．试验目的 蚜虫是同翅目的一个重要类群，发生种类多，繁殖速度快，对作物危害严重，因此开展对蚜虫 的防治工作意义重大。昆虫病原真菌蜡蚧轮枝菌（Verticillium lecanii）的寄主范围广泛，主要寄生在 介壳虫、粉虱、蚜虫、蓟马等多种害虫，还能寄生于鞘翅目、鳞翅目等害虫（Hall ，1981；Vestergaard ， et al，1995）。作为微生物杀虫剂，已被多个国家应用于蚜虫、粉虱等害虫的防治。蜡蚧轮枝菌不同 菌株间的生长特征和毒力存在着差异，不同菌株在毒素种类和产量方面也有差异。前次试验（见报 告-050418 ）已表明，蜡蚧轮枝菌菌株 Vl-3411、Vl-3542 和Vl-63098 的孢子对蚜虫具有较强的侵染 致病力。本试验用喷雾法测定了这 3 株蜡蚧轮枝菌的胞外代谢产物对蚜虫的毒力，现将试验结果报 告如下。 2 ．试验方法 2.1 材料：供试 3 个菌株为本研究室保存的菌株 Vl-3411 和由福建农大王联德博士提供的 Vl-3542 和 Vl-63098，供试蚜虫饲养在本研究室的温室内。 2.2 蜡蚧轮枝菌的培养：配制查贝克发酵培养基（蔗糖 3.0%，NaNO 0.2%，酵母粉 0.5%，K HPO 3 2 4 0.1%，MgSO 0.05% ，KCl 0.05% ，FeSO 0.001% ，pH7.0-7.2 ），120rpm、26℃下振荡培养蜡蚧轮枝 4 4 菌菌株Vl-3411、Vl-3542和Vl-63098。 2.3 7d 后，停止发酵。培养液用干燥的 2 层无菌纱布过滤除去菌丝体，收集滤液，用血球计数板 计滤液的孢子浓度；滤液经 10000rpm 离心 20min 后，分别收集上清液和沉淀（孢子）；上清液即为 菌株的胞外代谢产物粗提液，备用。 2.4 对蚜虫的毒性试验 2.4.1 供试蚜虫的准备：从温室的甘蓝菜叶片上挑取无翅成蚜到新鲜的甘蓝叶片上（叶片放置 在塑料培养皿内，皿底覆盖一层 0.7%的琼脂），放置在人工气候箱内培养，24h 后挑取幼蚜用于试验。 2.4.2 试验分为 4 处理：处理E、F和G分别为菌株Vl-3411、Vl-63098 和Vl-3542 的胞外代谢产 物粗提液，H为菌株Vl-3411 的孢子悬液（孢子浓度为 1.0×108cfu/ml）。 2.4.3 在各处理液中加入少量吐温-80 至其终浓度为 0.05%。用毛笔挑取 15 只大小一致的蚜虫 置于铺有滤纸的培养皿内，用微型喷雾器将各处理液均匀喷布于蚜虫虫体上，20min 后将蚜虫挑到 新鲜的甘蓝叶碟上（叶碟放置在塑料培养皿内，皿底预先加有 0.7%的琼脂，盖上密封的皿盖），置 于人工气候箱（26±1℃，L：D=14：10）内培养。每处理重复 3 次，以含 0.05%吐温-80 的清水处理 为对照。每天检查蚜虫死亡情况，计算死亡率。用 DPS 软件进行死亡率的显著性差异比较。 第 ３ 页 共 5 页 试验报告