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毒力基因的检测及其序列分析
一 25一 中国动物检疫 2009年第 26卷第 3期
栏目主持人：胡藕祥 gdwjy@i．。。m
猪链球菌 2型四川分离株
毒力基因的检测及其序列分析
赵永刚 ，王君玮 ’，王志亮 ，赵云玲 ，王清华 ，张 维 ，陈义平 ，刘华雷 ，王 华 z，王伟伟 。，田晓灵
(1．中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心，山东青岛，266114；
2．扬州大学农学院，江苏扬州 225600；3．四川衣业大学，四川成都 6100O0)
摘 要：根据猪链球菌2型的MRP、EPF和SLY基因设计合成了四对引物，对我们分离鉴定的2005四川分离株进
行毒力因子检测，并对阳性产物测序比较。结果以分离株为模板，获得 了与预期结果一致的867bp(MRP)、572bp(EF)
的2个片段，以及 SLY的长度为 1502bp目的片段 (外引物)和 1443bp的 目的片段 (内引物)。说明分离株 SSse0501
为MRPEFSLY，属于具有 3种主要毒力因子的强毒株。经对PCR阳性产物测序及序列分析，结果其与P1／7株的核苷
酸序列完全一致，与 1933株的同源性达 99．7％，仅在 128位 、217位、744位、1380位 、1386位的5个核苷酸发生突
变。在氨基酸水平上SSsc0501株与 1933株的同源性达99．6％，有 2个氨基酸发生替代
关键词：猪链球菌2型；毒力基因；检测；序列分析
中图分类号：$852．611 文献标识码：A 文章编号：1005—944X(2009)03—0025—04
S(xlUenC~ AnalysisandVimlmce-mlatedGenesDetec0n
ofstrep1∞仪=llss 2IsolatedinSichuanProvince
ZhaoYonggang，WangJunwei，WangZhiliang，ZhaoYunling，WangQinghua，ChenYiping，LiuHualei，
WangHua2,Wang WeiweP,TianXiaoling
(1N．ationalDiagnosticCentreforExoticAnimalDiseases，CAHEC，MOA，Qingdao Shandong266114：2．YangZhou
University，YangzhouJiangsu 225600；3．SichuanAgriculturalUniversiyt，ChengduSichuan 610000)
Ab醣哺魄 ：Virulence-related factorsofSSsc0501，a strain ofSrteptococcusSuisserotype2，isolated duringthe
2005 outbreak in Sichuan Provinceweredetectedand sequenced．Digested with EcoR I，htePCR productcan
producea867bp(MRP)anda572bp (EF)DNA rfagmentasexpected，aswellasa1502bp (exoprimer)anda
1443bp (innerprimer)DNA framg entsofsLY gene． TheresultrevealedthatSSsc0501wasahigl1virulentsrtain
Wjch MRP十E SLY Tbe PCR product from SSsc0501 srtain was sequenced and nucleotide sequence analysis
revealed thattheslygenefrom srtainSSsc0501hadahighhomologyto srtanis1933(99．7％)andP1／7 (100％1．
Only 5 nucleotidesdeveloped mutantsin site 128，217。744，1380 and 1386 of1933 srtain．Aminoacid analysisalso
demonstratedhighlyhomologous(99．6％
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