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重组肠激酶
ShanghaiYaxinBiotechnologyCo.,Ltd. Tel:+86-21Fax:+86-21
重组肠激酶
1.产品简介
这是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白酶。肠激酶(EC
是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 -
天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。
2.产品优势
高纯度
(图一) (图二
高特异性
1 特定的蛋白酶,切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨
酸 - 赖氨酸 (DDDDK)
2)不含其他蛋白酶,无非特异性切割
图一:SDS检测结果,纯化的肠激酶一个单一的主带
图二:0.1U的EK作用于50µg底物0min,10min,20min,30min,40min,50min,60min后的SDS分析
酶切条件:
按照酶活性定义,重组EK酶切条件举例:25mMTris-HCl8.0体系中:
融合蛋白浓度 0.1-1mg/ml (蛋白总量0.50-1.0mg
重组EK用量 1.0-2.0U
温度 25℃
过夜酶切,或完全酶切需12h-16h。
常见影响肠激酶活性的因素
在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切:
1)为获得理想酶切结果,请将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中,再进行酶切。
2 若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶
切,酶的用量与蛋白的比例不变(即1U酶切0.5mg蛋白 。
3 如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较
好酶切效果。
3.产品用途
用于去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签
4.产品特性
来源 重组大肠杆菌
分子量 理论MW:25,850DA
活性 1U定义:25℃,12h~16h内,在25mMTris-HCl8.0缓冲液中切割0.50mg融合蛋白95%所需的酶量。
储存 储存在-20℃.
稳定性 可以在常温下运输,在25℃,可稳定保存一周;酶液可反复冻融数次,对酶活无影响。
5.产品信息
产品名称 产品编号 活性 包装 产地
重组肠激酶 EK0801 ≥1U/μl;≥5U/μl 100U ;1kUorbulk 上海雅心
466YinDuRoad,XuHui,Shanghai,China Tel:021ax:021
h p://,email:sales@
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