控制菌检查用培养基适用性验证方案.docVIP

控制菌检查用培养基适用性验证方案 1．试验目的 控制菌检查用培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是为了确认麦康凯液体培养基、麦康凯琼脂培养基、RV沙门菌增菌液体培养基、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基、三糖铁琼脂培养基适合大肠埃希菌、沙门菌的控制菌检查。 2. 试验方法 照中国药典2015版四部非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法（通则1106）进行试验。 3.试验材料 3.1 培养基 名 称 来 源 批 号 麦康凯液体培养基 麦康凯琼脂培养基 RV沙门菌增菌液体培养基 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基 三糖铁琼脂培养基 麦康凯液体对照培养基 麦康凯琼脂对照培养基 RV沙门菌增菌液体对照培养基 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂对照培养基 三糖铁琼脂对照培养基 3.2 菌种 验证菌株 来源 批号 大肠埃希菌CMCC（B）44102 金黄色葡萄球菌 CMCC（B）26003 乙型副伤寒沙门菌CMCC（B）50094 3.3 仪器 XXXXX水平流净化工作台/生物安全柜、XXXXX立式压力蒸汽灭菌器、XXXXX电热恒温培养箱(30～35℃)、XXXXX生化培养箱（20～25℃）、XXXXX气浴恒温振荡器 3.4 稀释剂 0.9%无菌氯化钠溶液 4.试验过程 4.1菌液制备 用0.9%无菌氯化钠溶液制成每0.1ml含菌数为不大于100cfu的菌悬液，菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2?8℃，可在24小时内使用。 4.2 适用性检查 4.2.1 麦康凯液体培养基适用性检查 取大肠埃希菌菌悬液各0.1 ml分别接种于被检培养基和对照培养基中，在35℃条件下培养24h，进行促生长能力检查。 取金黄色葡萄球菌菌悬液各0.1 ml接种于被检培养基和对照培养基中，在35℃条件下培养24h，进行抑制能力检查 4.2.2 麦康凯琼脂培养基适用性检查 取大肠埃希菌菌悬液各0.1 ml分别涂布被检培养基和对照培养基平板上，在35℃条件下培养24h，进行促生长能力和指示特性检查 4.2.3 RV沙门菌增菌液体培养基适用性检查 取乙副伤寒沙门氏菌菌悬液各0.1 ml接种于被检培养基和对照培养基中，35℃条件下培养24h，进行促生长能力检查进行促生长能力检查被培养基菌与培养基上的菌落落形态被培养基菌与培养基上的菌落落形态 表3 RV沙门菌增菌液体培养基适用性检查结果 菌种类型 被检培养基 对照培养基 A/B（%） 被培养基菌与培养基上的菌落落形态被培养基菌与培养基上的菌落落形态三糖铁琼脂培养基适用性检查被培养基菌与培养基上的菌落落形态6．试验结论