单纯疱疹病毒实时PCR检测以及与巢式PCR和病毒培养方法的比较2010.pdf

深圳中西医结合杂志 2010 年8 月 第20 卷第4 期 ·193 · ·实验论著· 文章编号 〔 〔 1007 -0893(2010 ) 04 -0193 -04 单纯疱疹病毒实时PCR 检测 以及与巢式PCR 和病毒培养方法的比较 张修发 张 萍 祝爱霞 江 凡 蔡叶琴 （深圳市宝安区妇幼保健医院，广东 深圳 518133） 〔摘 要〕 目的：在Lightcycler 系统上建立和评价HSV -1、HSV -2 型病毒的实时定量PCR 方法，并与巢式PCR 和病毒 分离培养的结果进行比较。方法：120 例从疑似单纯疱疹病毒感染患儿口腔黏膜及唇黏膜取样，进行实时PCR，巢式PCR 和病毒分离检测HSV -1、HSV -2 的感染情况。结果：HSV -1 阳性率：病毒分离和巢式PCR 分别为34/120 （28.3% ）和 36/120 （30% ），实时PCR 为38/120 （31.7% ）；HSV-2 的检测：病毒分离阳性率为5/120 （4.2%），巢式PCR 阳性率为 7/120 （5.8% ），实时PCR 阳性率为8/120 （6.7% ）。结论：实时PCR 增加了单纯疱疹病毒DNA 检出率，尤其是和病毒分 离相比。实时PCR 和巢式PCR 在敏感性上没有显著性差异。实时PCR 技术具有快速扩增，降低污染风险的优势，它是诊 断单纯疱疹病毒感染的一种合适方法。 单纯疱疹病毒 型；单纯疱疹病毒 型；实时 ；巢式 〔关键词〕 Ⅰ Ⅱ PCR PCR 〔中图分类号〕 Q93-33 1 〔文献标识码〕 A Detection of Herpes Simplex Virus with Real-time PCR and Comparision with the Method of Nested PCR and Virus Isolation ZHANG Xiu-fa, ZHANG Ping, ZH U Ai-xia, JIAN G Fan, CAI Ye-qing （Shenzhen Baoan Maternal and Child Health Hospital, Guangdong Shenzhen 518133 ） 〔Abstract 〕 ObjectiveTo set up and evaluate HSV-1, HSV-2 qualitative real-time PCR on the Lightcycler system and to compare the results with those of the in-house nested PCR and virus isolation. Methods120 consecutive samples from herpe s lips lesions from children suspected of having HSV infections were tested with real-time PCR, nested PCR and virus isolation. Results34 and 36 samples (28.3% and 30%) were positive for HSV-1 by virus isolation and nested PCR, whereas 38 (31.7%) were positive by real-time PCR. HSV-2 was detected in 5 samples (4.2%) by virus isolation, in 7(5.8%) by nested PCR and in 8(6.7%) b