细胞中的定位研究 - 大连医科大学学报.pdf

大连医科大学学报 第 24 卷第 2 期 VoI. 24.No.2 2002 年 6 月 Journal of Dalian Medical University Jun.2002 丈章编号: 1000 - 5676(2002)02 - 0091 - 03 P - 170 糖蛋白在多药耐药(MDR)K5621ADM 细胞中的定位研究 高船舟曲淑贤吕广艳郝立宏2 杨佩满2 (1.大连医科大学分析测试中心，辽宁大连 116027;2. 大连医科大学组织胚胎学教研室，辽宁大连 116027) 摘要:目的:确定 P -170 糖蛋白在多药耐药(MDR) K562/ADM 细胞中表达的位直。方法:通过免 疫反应并利用流式细胞仪(FCM)检测表达 P-170 糖蛋白细胞的百分含量;用免疫电镜技术检测 P -170 糖蛋白在细胞中的位直及其表达水平。结果:敏感株 K562 细胞与耐药株 K562/ADM 细胞 对 P- 170 糖蛋白的表达有非常明显的差异;不同的 K562/ADM 细胞表达 P - 170 糖蛋白的量盖 别较大;少量的 K562 细胞也有极少的 P-170 糖蛋白的表达;细胞表达的 P - 170 糖蛋白位于细胞 膜上。结论:多药耐药 K562/ADM 细胞表达的 P -170 糖蛋白最终被镶嵌在细胞膜上;在该蛋白质 从被表达、修饰和转运到细胞膜上的过程中，该蛋白质不具有成熟 P - 170 糖蛋白的特异构象。 关键词:多药耐药;P - 170 糖蛋白;免疫电镜 中圄分类号:R73 - 3 文献标识码:A 肿瘤的多药耐药(Multidrug resistance , MDR) 1 材料和方法 是临床上对肿瘤实施化疗治疗过程中遇到的一种令 1. 1 材料 人困扰的问题，随之产生了与其相关的基础和临床‘ 研究。这些研究涉及化疗药物的化学结构与作用机 1.1. 1 药品与试剂:RPMI MEDIUM 1640(GIBCO 制、不同肿瘤的耐药机制、特异性的广普逆转剂等 BRL 产品) ;盐酸阿霉素速榕粉针剂(Adriamycin 方面，并在组织、细胞和分子水平上展开研究。我们 Rapid Dissolution Powder Injection , AD M) (意大利 在对人红白血病细胞株 K562 的相应耐阿霉素 法玛西普公司产品); P - glycoprotein Cone JSB - 1 (Adriamycin , AD M)细胞株 K562/ADM 多耐药机 (晶美生物工程有限公司提供);羊抗小鼠 IgG 肢体 金 -5 nm(武议博主德生物公司提供);Mouse 19C 凿带逆转剂的研究中发现，虽然已有报道认为， - PE 抗体(IMMUNOTECH A COULTER COM- MDR 的一个重要机制是细胞过表达一种糖蛋白(P - glycoprotein , P - 170) , P - 170 糖蛋白的分子量 PANY FAG 产品) ;封闭用羊血清(北京中山生物 技术有限公司提供);与常规免疫电镜技术有关试剂 为 170 KD ，定位于细胞膜上的膜转运蛋白，是一种 ATP 依赖性化疗药物外排泵[1]