两种木贼提取物对动脉粥样硬化早期大鼠主动脉内皮细胞影响.pdf

中文摘要 两种木贼提取物对动脉粥样硬化早期 大鼠主动脉内皮细胞的影响 摘 要 目的：前期实验表明木贼水煎剂可以调节脂代谢、抑制 内皮细胞(endothelialcell，EC)凋亡，抗动脉粥样硬化 提取分离，对比观察提取物对大鼠主动脉EC凋亡的影响及 其形态学变化，探讨木贼保护血管内皮的有效部位及其可能 机制。 方法： 1木贼有效部位的提取、分离 木贼水煎剂经正丁醇萃取、分离为两部分，其中正丁醇 萃取液回收至干，蒸馏水定容至1．259(生药)／ml；剩余液亦 浓缩至相同浓度，均冰箱保存备用。 2两种木贼提取物的药效动物实验 健康雄性SD大鼠50只，随机分为五组：正常组、模型 组、吉非罗齐组、木贼正丁醇提取物组、正丁醇提取剩余物 组，每组10只。给药组每天饲喂高脂饲料且按lOml／kg标准 灌胃给药，分别合吉非罗齐O．169／(kg．d)，生药木贼 12．59／(kg．d1，正常组和模型组每天灌等量生理盐水，并随动 物体重增加及时调整药量。 3指标检测 cholesterol， 九周末眶后取血，酶法检测：胆固醇(total density 中丈摘要 lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(10wdensitylipoprotein， low density LDL)、极低密度脂蛋白(very 流式细胞术检测EC周期、凋亡率及相关基因caspase．3、突 index，PI)；分别以肉眼、光镜及电镜观察主动脉内膜形态变 化。 结果： 1实验大鼠一般状况 正常组大鼠饮食正常，活动自如。模型组体重增长较快； 但随实验进程，进食减少、精神较差。吉非罗齐组、两木贼 给药组大鼠饮食、活动、精神状态均明显好于模型组。 2两种木贼提取物对血脂的影响 0．01)，与正丁醇提取物组相比具有统计学意义(P0．01)。 变型p53、bcl．2蛋白表达的影响 对照组明显升高口0。05)，吉非罗齐组较模型组显著降低口 4两种木贼提取物对主动脉EC周期与凋亡的影响 模型组停留在Go／G，期的EC较正常对照组明显升高(P 中文摘要 物对细胞周期的影响与吉非罗齐相似，较模型组停留在 少(P0．01)。 5主动脉形态学改变 5．1肉眼观察 正常组血管弹性好，内膜平滑，富有光泽；模型组动脉 弹性减低，管壁稍增厚，光泽度稍差；吉非罗齐组、两木贼 给药组与正常组相比变化不明显。 5．2光镜观察 正常组动脉EC连续、形态规则，表面未见细胞粘附， 内皮下间隙较小。模型组血管壁增厚，内皮呈不连续性缺失， 底层胶原纤维暴露，内皮下间隙明显增宽。吉非罗齐组内皮 较连续，形态规则，明显好于模型组。正丁醇提取物组内膜 连续、光滑，EC排列整齐，明显好于模型组。提取剩余物 组内膜较光滑，部分EC缺失、单核细胞粘附，但好于模型 组。两木贼给药组之间未见明显差别。 5_3扫描电镜观察 正常对照组大鼠主动脉EC长梭形，核区饱满，连接紧密， 可见长短不等的典型微绒毛。模型组Ec排列紊乱，表面微绒 毛减少甚至消失，呈大小不等的虫蚀状、火山口状缺损，可 见细胞碎片、纤维素等附着。吉非罗齐组EC形态完整，轮廓 清晰，偶见小洞状破损。木贼正丁醇提取物组EC呈带状排列， 核区饱满，可见典型微绒毛，散在的脂肪小颗粒黏附。正丁 醇提取剩余物组EC连接较紧密，局部坏死、脱落，可见较大 中文摘要 脂肪颗粒黏附。 5．4透射电镜观察 正常对照组大鼠EC胞浆内吞饮小泡丰富，线粒体、内质 网形态正常。模型组EC坏死、脱落严重，残存细胞内吞饮小 泡、脂质空泡数量明显增多，线粒体肿胀、融合，粗面内质 网