bFGF对体外培养豚鼠LIM巩膜成纤维细胞增殖，TGF-β2、FGFR-1表达及其对细胞力学特性影响的研究.pdfVIP

中文摘要 bFGF对体外培养豚鼠LIM巩膜成纤维细胞增殖， TGF．B 2、FGFR．1表达及其对细胞力学特性影响的 研究 摘 要 目的：明确碱性成纤维细胞生长因子(”GF)对豚鼠镜 片诱导型近视眼(1ens．in．duced 2(TGF．13 纤维细胞的增殖程度，转化生长因子．13 2)、成纤 维细胞生长因子受体．1(FGFR-1)表达变化的影响，并结合 其对细胞力学特性的影响，从细胞因子和细胞力学的角度探 讨bFGF在近视眼的发病机制和治疗中的作用。 方法：2周龄豚鼠10只随机选取一眼用镜片诱导方法制 备近视动物模型(实验眼，LIM)，对侧为自身对照(对照眼， SC)。造模45天，实验前后均检测每只豚鼠双眼屈光状态、 眼轴长度。用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜成纤维细 胞，并传2代。用免疫组织化学法对培养的细胞进行鉴定， 再将每只眼培养的细胞分为A、B、C、D四组，分别为空白 bFGF组， 组、‘lng／mlbFGF组、10ng／mlbFGF组、100ng／ml 利用MTT的方法检测各组细胞增殖的程度；利用免疫组织 化学法对各组细胞TGF．132、FGFR-1进行半定量分析；利 用细胞微管吸吮的方法结合半无限体细胞力学模型 model)测定各组巩膜成纤维细胞的力学特性 (Half-space (包括成纤维细胞的杨氏弹性模量和粘弹性参数)。结果用 SPSS13．0统计软件进行统计分析。 结果： 中文摘要 1豚鼠实验性近视的诱导结果 镜片诱导前豚鼠双眼屈光度无明显差异，经过45天镜 片诱导，LIM组形成明显近视，LIM组与SC组比较，诱导 lmm， 出．6．704-1．93D的相对近视，眼轴相对延长了1．53±0．3 前后变化差异有统计学意义(氏O．05)。 2细胞培养及鉴定结果 豚鼠后极部巩膜组织块培养3～5天，周围开始有细胞长 出，2~3周融合，免疫细胞化学鉴定为成纤维细胞。 3MTT结果 MTT结果显示：LIM组中B组与A组之间差异无统计 学意义(尸O．05)，C、D．组和A组之间差异有统计学意义 组之间差异有统计学意义(氏O．05)，细胞数量分别增长 bFGF 细胞的促增生作用无明显差异(胗O．05)，但10ng／ml bFGF浓度相比，差异 的浓度对细胞的刺激效果和100ng／ml 有统计学意义(氏O．05)。 2、FGFR-1的表达 4巩膜成纤维细胞TGF．13 组与SC组中A组比较，其着色程度增高，差异有统计学意 B2盼撇化无明显统计学意义(尸O．05)。 组与SC组中A组比较，其着色程度下降，差异有统计学意 2 中文摘要 FGFR-1染色程度越来越深。经统计学分析细胞染色程度和 5细胞力学研究结果 5．1对照组与实验组后极部巩膜成纤维细胞力学特性及统计 学分析 分别对SC组中A组与LIM组中A组巩膜成纤维细胞 进行测量，得到SC组中A组巩膜成纤维细胞平衡杨氏模量 组巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量明显升高，两者之间差异 有统计学意义(氏O．05)。 对巩膜成纤维细胞进行微管吸吮测试发现，在某一恒定 负压作用下，巩膜成纤维细胞表现出典型的粘弹性固体蠕变 特征。SC组中A组巩膜成纤维细胞表观黏性 巩膜成纤维细胞的表观黏性明显升高，两者之间差异有