三羟基雄甾烯酮高转化菌株的选育及工艺优化.PDFVIP

李会 等/三羟基雄甾烯酮高转化菌株的选育及工艺优化 1687 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology November 25, 2013, 29(11): 1687−1691 /cjbcn ©2013 Chin J Biotech, All rights reserved 生物育种与工艺优化 三羟基雄甾烯酮高转化菌株的选育及工艺优化 李会，张明杰，张晓梅，李恒，史劲松，许正宏 江南大学药学院，江苏 无锡 214122 李会, 张明杰, 张晓梅, 等. 三羟基雄甾烯酮高转化菌株的选育及工艺优化. 生物工程学报, 2013, 29(11): 1687−1691. Li H, Zhang MJ, Zhang XM, et al. Breeding of high 3β,7α,15α-trihydroxy-5-androsten-17-one transforming strains and their conversion process optimization. Chin J Biotech, 2013, 29(11): 1687−1691. 摘 要 : 以能将去氢表雄酮 (DHEA) 转化为三羟基雄甾烯酮 (7α,15α-diOH-DHEA) 的赤霉菌 Gibberella intermedia CA3-1 为出发菌株，对其进行了诱变选育及工艺优化，以期提高转化效率。采用0.12 mg/mL 亚硝基 胍诱变处理赤霉菌孢子悬液30 min ，以350 μmol/L 酮康唑为最低抑制浓度进行抗性平板筛选，最终获得一株 遗传稳定性较好的高产菌株 M-10 ，其产物摩尔得率达到70.2% ，为出发菌株的 1.2 倍。通过摇瓶转化工艺的 优化，确定了突变菌株的最适转化工艺。在优化的转化工艺下，当底物 DHEA 投料浓度为 5 g/L 时， 7α,15α-diOH-DHEA 摩尔得率提高到 75.6% ，较原始菌株提高了31.3% 。 关键词: 赤霉菌，7α,15α-diOH-DHEA ，亚硝基胍，化学诱变，条件优化 Breeding of high 3β,7α,15α-trihydroxy-5-androsten-17-one transforming strains and their conversion process optimization Hui Li, Mingjie Zhang, Xiaomei Zhang, Heng Li, Jinsong Shi, and Zhenghong Xu School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University , Wuxi 214122, Jiangsu , China Abstract: In order to improve transformation efficiency of dehydroepiandrosterone (DHEA) into 3β,7α,15α-trihydroxy- 5-androsten-17-one (7α,15α-diOH-DHEA) by Gibberella intermedia CA3-1, we investigated the strains breeding and their Received: June 28, 2013; Accepted: August 9, 2013 Supported by: National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) (No. 2011AA02A211), National Nat