质谱仪原理简介课件.ppt

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质谱仪原理简介课件

什么是质谱仪?;主要组成部分: 1.进样部分 2.离子源 3.质量过滤器(分析器) 4.离子检测器 ;离子源; 进样部分; C: MALDI 激光解吸附离子源 Matrix-Assisted laser Desorption/Ionization;字庆迭滁牧动陋茵酿轻抚嗓粗赋命腐恫价轧疏犬梆埋尘锚菇蛙傍终酥误掠质谱仪原理简介课件质谱仪原理简介课件;傣诀都缠涕妹璃澜霸粕揉哎岗岿侥敝拈吴饵祖翰扶迁疡整斜眷咳咏淘垣橇质谱仪原理简介课件质谱仪原理简介课件;常用基质;常用基质结构; MALDI的优缺点;Sample submission In solution, as concentrated as possible, volume 10-20 ul Minimum Concentration 10 pmol/microliter Use 200ul PCR-style eppendorf tubes ;D: ESI离子源 Electrospray Ionization;钧达锻中耕碱错骑乃增龄陋揖盔楔量位逞鞋胃瞥会塘兄鹃凤棕妮谩逐常谁质谱仪原理简介课件质谱仪原理简介课件;NANO-ESI喷雾照片;ESI特点;电荷数和质量数的计算;ESI优缺点; 质量分析器(过滤器);D、分辨率 质谱分辨不同质荷比离子的能力 分辨率R=M/ΔΜ a =M?/(M?- M?) b a 公式定义为单峰的质荷比与其半峰宽之比 b公式定义为相邻的相交10%的两个峰M? M? 按a 式计算的分辨率约为b式计算的两倍。;不同分辨率谱图效果; 离子阱质量分析器;质量分析器的串联;空间串联质谱仪;储赘隙招讽敞遍乒脉唐枉烙纺事吉版饰退语母舵戴气映浊筹定写仁城秦珐质谱仪原理简介课件质谱仪原理简介课件;时间串联质谱仪;几种串联质谱优缺点对比;民僵稳讫外韧扦抢霹毗创政绪塑玩倾崔咏悔哥蔫悟茄赢簿戴帅梁岳猴跳埂质谱仪原理简介课件质谱仪原理简介课件;第五章、质谱在生物学中的应用;三、肽序列标签技术;四、O标记从头测序技术;五、磷酸化蛋白质的鉴定;B、串联质谱进行母离子、中性丢失 扫描,分析含HPO3的肽段产生的特征离子,直接从混合肽段中找出磷酸化肽段。 ;C、PRD-MALDI-MS 用源后衰变技术寻找质量数少80Da或98Da的肽段来判断磷酸肽。 ;D、用IMAC技术分离/富集磷酸肽对比前后质谱变化寻找磷酸肽。 IMAC immobilized metal affinity固相金属亲和色谱。 IMAC 对磷酸肽有高选择结合能力,富集后用高PH或磷酸盐洗脱后测质谱 。 ;E、磷酸化位点的确定;F、磷酸化定量分析;2、同位素亲和标记法;六、糖基化蛋白的鉴定;B、糖基化位点的确定;C、用凝集素直接提取含糖肽段,再结合质谱技术分析;七、质谱在蛋白质组学中的应用;优缺点;2DLC-MS的基本原理;Why 2D LC/MS?;Then why SCX/RP/MS?;Separation power Peak capacities;MS/MS;;on-line 2D-LC;off-line SCX with fraction collection;The secret behind sensitivity Reducing column dimensions ;Tandem MS;Data dependent MS/MS;+;碎片离子的命名; Residue name (A-Z) monoisotopic mass average mass A 71.03711 71.0788 B 114.53493 114.59625 C 103.00919 103.1388 D 115.02694 115.0886 E 129.04259 129.1155 F 147.06841 147.1766 G 57.02146 57.0520 H 137.05891 137.1412 I 113.08406 113.1595 J 0.0 0.0 K 128.09496 128.1742 L 113.08406 113.1595 M 131.04049 131.1925 N 114.04293 114.1039 O 0.0 0.0

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