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十七阿胶的抗人工血管栓作用
十七、阿胶的抗人工血管栓作用
用阿胶预衬人工血管后种植内皮细胞(EC),能明显提高EC在人工血管的粘附率,且对EC的生长和形态均有良好影响。阿胶的作用与纤维结合素相近,优于明胶和白蛋白,主要成分蛋白质多为非糖链蛋白,可抑制血小板在人工血管的粘附而减少血栓形成机会。
现代医学有临床测试:
试剂和材料:阿胶块,O.Ol%纤维结合素(FN):山东株式会社,大坂,日本。20%Albumin(Human)LosAngeles[JSA。20%明胶:大连生物制品厂产品。涤纶人工血管:上海编织厂产品。
EC的获取、预衬及培养:内皮细胞的获取,以胰蛋白酶灌注人脐静脉获取EC。将人工血管纵行剪开,内腔面向上固定于自制塑料环中,以阿胶等预衬物浸透人工血管,近干燥时使用,另设对照组。
将细胞悬液等量地注入人工血管,37℃,5%CO。浓度下培养,24小时后测细胞数,计算粘附率,另分别于24小时及3~5天后取出人工血管制成扫描电镜标本。
电镜标本的制备及观察:以不同浓度阿胶处理人工血管后,制成透射电镜标本,按比例测量阿胶膜厚度,测量切面上阿胶膜附着长度估算附着面积。扫描电镜标本制备及观察:取出人工血管,戊二醛固定,乙醇梯度脱水、干燥、喷金、扫描电镜下观察、拍片。粘附细胞数测定:培养液中掺入。H—TaR计算粘附细胞数。
数据处理:按Smilrio氏法决定所得异常值的取舍,以方差分析检验所得数据差异的性质。
结果
人工血管扫描电镜下观察结果:单纯人工血管所见,纤维排列呈条索状,不很规则,纤维间有缝隙,束束之间有凹陷。10%阿胶预衬后所见,人工血管腔面有一层约O.5微米的阿胶膜,充填于凹陷处及缝隙,纤维裸露区15%。
培养24小时后SEM下观察:10%阿胶预衬组,细胞呈梭状,胞浆丰满,胞核明显,大部分细胞有初生伪足。对照组,有较多圆形细胞,少部分有初生伪足,细胞密度低于阿胶组。
培养3~5天后SEM观察:10%阿胶组,细胞为多角梭形,有大量伪足呈树枝或丝状,大部分细胞融合,单层不重叠呈铺路石样镶嵌排列。对照组,较多椭圆形细胞,伪足少,融合少见。
讨论
涤纶等合成材料对EC有排斥作用,加之人工血管、内膜面不平坦,不利于EC的附着和生长,另外有的缝隙较大,使蕊分EC丢失。因此,单纯人工血管种植EC后附着率不高,本实验为27%。经阿胶处理后粘附率明显提高达74 %(10%阿胶),且细胞形态较好,易融合。这主要是因为:阿胶的充填作用,使内膜面趋于平坦,有利于EC粘附呈单层排列,也使EC丢失减少。阿胶的附着降低了合成材料的排斥性。阿胶的主要成分为高分子胶原蛋白及凝胶蛋白与血管基底膜成分相近,可能对EC有趋化作用。
阿胶处理后的人工血管近干燥时,15%浓度的弹性明显下降,10%有轻度降低,5%降低不明显。在透射电镜下观察,5%的阿胶膜较薄,厚度在O.3微米以下,无明显充填作用,裸露区较大,在30%以上;10%厚度在O.5微米左右,充填作用较好,内膜面趋向平坦。裸露区在15%左右;15%厚度1.O微米,不均匀,有较多的隆起。种植24小时后,15%、10%和59%浓度的粘附率分别为7l%、74%和53%综上所述,lO%浓度阿胶效果较好。
人工血管与血液接触后,吸附血浆蛋白,若为糖链蛋白:如纤维蛋白或7一球蛋白时,则与血小板形成复合体产生血栓。E、N胶原等属于此类,既能使EC粘附率增高,也能使血小板沉积增加而增加血栓形成机会。阿胶的成分蛋白多属于非糖链蛋白,故此可以推论阿胶既能提高EC粘附率,进入体内后又可竞争性地抑制血流中糖原蛋白的附着,即使在无EC附着的裸露区,可能也会减少血栓形成机会。
阿胶作为异种蛋白进入人体后可能会引起免疫反应,是否可以引起剧烈变态反应及局部改变有待于进一步研究。
小节:
药理试验表明,阿胶具有升高红细胞和血红蛋白量的作用,可促进造血功能;能升高白细胞、升高血小板、升高血氧含量;有扩张微血管,扩大血容量,降低全血黏度和降低血管壁通透性的作用;能增加血清钙的含量,改善人体内钙的平衡,使低钙血症趋于正常;并有止血、抗疲劳、抗休克、抗辐射、抗肌萎、耐寒冷、提高机体免疫功能、滋阴补肾、强筋健骨、利尿消肿等作用。
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