化学辅助去核法对绵羊卵母细胞去核率和重构胚发育率的影响.PDFVIP

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化学辅助去核法对绵羊卵母细胞去核率和重构胚发育率的影响

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, April 25; 25(4): 503-508 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 动物及兽医生物技术 1 2 1 1 1 3 4 潘晓燕 , 王正朝 , 李质馨 , 金玉姬 , 窦肇华 , 郭志勤 , 王锋 1 , 132013 2 , 23298 3 , 830000 4 , 210095 : 为提高绵羊体细胞核移植的效率, 本研究采用一种新的去核方法—化学辅助去核法, 对绵羊体外成熟的卵母 细胞进行去核, 研究了化学诱导剂秋水仙素的处理浓度、作用时间、卵母细胞的成熟时间对去核效果及重构胚发育的影 响。结果表明: 1) 卵母细胞在0.4 μg/mL 的秋水仙素溶液中分别孵育0.5 h 和 1 h, 胞质突起率和去核率没有显著的差异, 突起率可高达85.4%, 去核率达到 100%; 2) 0.2 μg/mL 或0.4 μg/mL 秋水仙素溶液将卵母细胞处理 0.5 h, 对去核效果没 有显著影响; 3) 对于体外成熟 18~23 h 的卵母细胞, 随着成熟时间的延长, 盲吸法的去核率降低, 但没有影响秋水仙素 诱导胞质突起的比率和去核率; 4) 两种去核方法对重构胚的发育没有产生显著影响, 但成熟21~23 h 卵母细胞重构胚囊 胚的发育率显著高于成熟 18~20 h 卵母细胞重构胚囊胚的发育率。综上所述, 本试验优化了绵羊卵母细胞化学辅助的去 核程序, 利用化学辅助去核法对高卵龄的绵羊卵母细胞进行去核, 提高了去核率和重构胚的体外发育率。 : 秋水仙素, 卵母细胞, 化学辅助去核, 重构胚 Effect of the chemically assisted enucleation on the enucleation of sheep oocytes and the development of their reconstructed embryos 1 2 1 1 1 3 4 Xiaoyan Pan , Zhengchao Wang , Zhixin Li , Yuji Jin , Zhaohua Dou , Zhiqin Guo , and Feng Wang 1 Department of Histology and Embryology, Jilin Medical College , Jilin 132013, C

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