IL-6对BV2小胶质细胞系铁代谢相关蛋白的影响和其调控机制研究.pdfVIP

IL一6对BY2小胶质细胞系铁代谢相关蛋白的影响及其调控机制研究 摘 要 帕金森病(Parkinson’Sdisease，PD)以静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿势 反射障碍为主要症状。病理上表现为中脑黑质致密带(substantia nigra parscompa 下降。在可能引起PD发病的原因中，神经炎症越来越引起人们的关注。PD患者黑 质(substantia nigra，SN)中出现小胶质细胞的激活，脑脊液中肿瘤坏死因子．Q(t umornecrosis B(interleukin．1B，IL．1 factor，TNF．Q)、白细胞介素l B)和白 细胞的激活。PD患者SN中炎症发生时，激活的小胶质细胞中铁含量异常升高，并 且激活的小胶质细胞可以影响到SNpc铁的聚集，此外本实验室前期己证明TNF． Q、IL．1 B可以影响神经元的铁代谢。那么小胶质细胞释放的IL．6是否会影响其自 身铁代谢的变化?本实验应用细胞培养、M1vr、荧光定量PCR、免疫印迹等多项研 究技术，观察了铁对BV2小胶质细胞释放的IL．6的影响以及IL．6对BV2小胶质细、 胞铁代谢的影响。结果如下： 1．100la ammonium mol／L枸橼酸铁铵(ferriccitrate，FAC)处理BV2细胞12h后， BV2细胞中IL．6mRNA上调了30％，与对照组相比，差别有统计学意义(P0．05， n=6)。 2．选用30 IL-6处理BV2细胞24h，结果显示各组活 ng／ml、50ng／ml、100ng／ml 性与对照组相比细胞的存活率没有变化(P0．05，n-4)。30 ng／ml被选为后继实验 中所应用浓度。 3．30 IL一6处理BV2细胞24h，BV2细胞中铁调节蛋白1(iron ng／ml regulatoryprotein 4．30 IL．6处理BV2细胞24 ng／mI 的蛋白表达水平下调，与对照组相比，差别有统计学意义(P0．05，n=5)。 5．30 IL．6处理BV2细胞1h，BV2细胞中磷酸化的JNK丝裂原活化蛋白激酶 ng／ml N．terminal 类(c．Jun kinase，JNK)水平显著增加(PO．05，n=3)。 6．10lamoi／L、20．umol／L SP600125处理BV2细胞24h，处理组与对照组相比细 u 胞的存活率没有变化(P0．05，n=4)。10mol／L被选为后继实验中所应用浓度。 lamol／L 7．预先用10 JNK特异型抑制剂SP600125处理BV2细胞lh后，加入30 IL．6继续作用24h，可以抑制由IL．6引起的IRPI蛋白表达水平上调，与IL．6 ng／ml 处理组相比差别有显著性(PO．05，n=4)。 umol／L 8．预先用10 JNK特异型抑制剂SP600125处理BV2细胞lh后加入30 IL．6继续作用24h，可以抑制由IL．6引起的FPNI蛋白表达水平下调，与IL．6 ng／ml 处理组相比有统计意义(P0．05，n=4)。 上述结果表明，FAC可增加BV2小胶质细胞IL．6mRNA的表达。IL．6可以使 小胶质细胞合成IL．6增多，而IL．6可以调控BV2小胶质细胞铁代谢相关蛋白，该 过程是通过JNK信号途径实现的。本研究为PD炎症发生与铁代谢异常的相互作用 提供了强有力的实验基础与