异牛肝菌素对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制及诱导凋亡的分子机制研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………6 研究论文异牛肝菌素对人肝癌细胞SMMC．7721的增殖抑制和诱导凋 亡的分子机制研究 前言……………………………………………………………………．．12日lJ舌……………………………………………………………………．．12 材料与方法……………………………………………………………．．13 结果……………………………………………………………………．．20 附图……………………………………………………………………．．23 附表……………………………………………………………………．．32 讨论……………………………………………………………………．．36 结论……………………………………………………………………．．38 参考文献………………………………………………………………．．38 综述蘑菇的药用价值研究………………………………………………．．42 致谢…………………………………………………………………………．．56 个人简历……………………………．．………………………………………57 中文摘要 分子机制研究 摘 要 目的：恶性肝脏肿瘤是导致死亡的主要原因之一。据统计，在亚洲，肝 癌的发病率是最高的，尤其是在中国和日本。在中国，每年10万人中就有 50人罹患此病。目前，中国肝癌是第二位引起癌症死亡的病因。传统的手 术切除，并辅助以放疗、化疗等手段依然是主要的治疗措施。目前，临床 上用的化疗药物在杀死癌细胞的同时，也杀死了正常的细胞和淋巴细胞， 给患者造成了很大痛苦，因此，寻找高效、低毒的药物是摆在我们每位医 务工作者面前的艰巨任务。来自植物和大型真菌的天然代谢产物是这类药 物的首选。 luteus)子实体中 异牛肝菌素(iso．suillin)是从褐环粘盖牛肝菌(Suillus 分离纯化得到的一种化合物，相对分子量为440．29，化学名为3，6．二羟基 l，1 ．[(2E，6E，10E)．3,7，l5．六甲基十六碳．2，6，10，14．四烯】苯乙酯，属于聚 异戊二烯酚类化合物，是粘盖牛肝菌素suillin的同分异构体。初步研究结 方法： 清、青霉素100 养箱培养。 24 h、48 h， h和72 gM)分别作用于对数生长期的人SMMC．7721细胞24 应用四甲基偶氮唑蓝(Methythiazolyl 光密度值(Optical 细胞培养48h，检测三种药物对细胞增殖的影响；最后取不同浓度的 iso．suillin、顺铂作用于人淋巴细胞24h，检测其对正常人淋巴细胞的影响。 中文摘要 培养。定时检测细胞生长情况，每孔加入5 MTT20 mg／mL gl，继续孵育4 DMSO)。用酶标仪NIJ490nln波长吸光值(彳值)，每组设8个复孔，根据 取其平均值并绘制细胞活性柱形图。 3．流式细胞术检测细胞周期和凋亡率将处于对数生长期的SMMC．7721 Annexin 5 V．FITC／PI进行荧光染色1 min后进行流式细胞分析。计算出Go／ G1、S、GJM期及早期和晚期凋亡分布百分比。