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北京雷根生物技术有限公司 BCA 蛋白浓度测定试剂盒 产品简介 ： 目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是 ：BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和 Bradford 法蛋白定量试剂盒 （Bradford Protein Assay Kit) 。BCA 法与传 统方法相比 ，更简单、更稳定、更灵敏度。 BCA 法测定蛋白浓度兼容性亦很好 ，其不受大部分样本中其他成分的影响，对于 5% 以内的 SDS、Triton X-100、Tween 20、 Tween 80 具有很好的兼容性。BCA 法测定蛋 白浓度易受螯合剂、高浓度的还原剂影响。在 BCA 法测定蛋白浓度前 ，应尽量使EDTA 浓 度≤m10M; DTT 浓度 ≤1mM，2-ME≤0.01%。 BCA 法在 50～1000μg/ml 浓度范围内有较好的线性关系 ， 其最小检出量为 25μ g/ml。 产品组成 ： 编号 PT0001 PT0001 Storage 名称 250T 500T 试剂(A): BCA 试剂 A 50ml 100ml RT 避光 试剂(B): BCA 试剂 B 1.5ml 3ml RT 避光 试剂(C): 蛋白标准(BSA) 20mg 20mg RT 试剂(D): 蛋白标准配制液 1.5ml 1.5ml RT 使用说明书 1 份 主要成分 ： 试剂(A): 主要由 BCA、碳酸氢钠等组成。 试剂(B): 主要由硫酸铜等组成。 试剂(C): 主要由超高纯度 BSA 粉末组成。 试剂(D): 主要由超纯水、防腐剂等组成。 自备材料 ： 1、酶标仪或分光光度计 2、微量移液器 3、96 孔板或离心管 操作步骤 （仅供参考）： 1、取 1ml 蛋白标准配制液加入到蛋白标准(BSA)(20mg)中，充分溶解后配制成 20mg/ml 北京雷根生物技术有限公司 的蛋白标准溶液 ，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。 2、取适量 20mg/ml 蛋白标准 ，稀释至终浓度为500μg/ml 或所需浓度。例如 ，取 25μl 20mg/ml 蛋白标准 ，加入975μl 稀释液 ，充分混匀，即配制500μg/ml 蛋白标准。特 别提示 ：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。 例如 ，待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取20mg/ml 蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 作为溶解 BSA 稀释液。稀释后的 500μg/ml 蛋白标准也可以-20℃ 长期保存。 3、根据样品数量 ，按试剂(A):试剂(B)=50:1 的比例配制 BCA 工作液 ，即取50 份 BCA 试 剂 A 和 1 份 BCA 试剂 B， 充分混匀 ，即获得BCA 工作液。例如取 5mlBCA 试剂 A 和 0.1ml BCA 试剂 B，配制成 5.1ml BCA 工作液。BCA 工作液室温 24 小时内稳定。 4、 将标准品按 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到 96 孔板的标准品孔中 ，加稀释液补足到20 μl。 5、加适当体积待测蛋白样本到 96 孔板的样品孔中。如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样