猪圆环病毒2型Rep基因真核表达载体的构建和免疫原性分析.PDFVIP

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2017-08-14 发布于天津
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猪圆环病毒2型Rep基因真核表达载体的构建和免疫原性分析.PDF

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猪圆环病毒2型Rep基因真核表达载体的构建和免疫原性分析

上海农业学报　２０１６，３２（１）：６９ＡｃｔａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅＳｈａｎｇｈａｉＤＯＩ：１０．１５９５５?ｊ．ｉｓｓｎ１０００３９２４．２０１６．０１．０２文章编号：１０００３９２４（２０１６）０１００６０４２Ｒｅｐ猪圆环病毒型基因真核表达载体的构建和免疫原性分析１，２２２２ １，２１，２１，２　，，　，，，　，王静刘成倩李红易建中于宗幸陈磊孙晓云１２（，２０１３０６；，２０１１０６）上海海洋大学水产与生命学院上海上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海　：ＧｅｎＢａｎｋ２（ＰＣＶ２）１，ＰＣＲ摘要根据发表的猪圆环病毒型基因序列设计并合成对特异性引物进行扩，ＰＣＶ２ＰＣＶ２Ｒｅｐ，ＰＣＲ，ｐＥＧＦＰＣ１，增从突变株中扩增出基因对扩增产物清洁后进行双酶切连接到载体上转ＤＨ５，ＰＣＲ，。化到大肠杆菌 α感受态细胞中经筛选和测序后鉴定出正确的重组基因完成真核表达载体的构建ＰＫ１５，ＤＮＡ，ＰＣＲＲｅｐ，。将重组质粒转染到细胞中收取病毒液抽提检测到基因证明转染是成功的进行间接免，ＲｅｐＰＫ１５，Ｒｅｐ。疫荧光试验可以检测基因在细胞中的表达试验结果很好的验证了基因的免疫原性这为进一步研究ＰＣＶ２的生物学活性及ＰＣＶ２新型疫苗奠定了坚实的基础。：２；Ｒｅｐ；；关键词猪圆环病毒型基因真核表达载体间接免疫荧光中图分类号：Ｓ８５２．６５　　文献标识码：ＡＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓｏｆｅｕｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｏｆｐｏｒｃｉｎｅｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓｔｙｐｅ２Ｒｅｐｇｅｎｅ１，２２２２ １，２１，２１，２ＷＡＮＧＪｉｎｇ，ＬＩＵＣｈｅｎｇｑｉａｎ，ＬＩＨｏｎｇ，ＹＩＪｉａｎｚｈｏｎｇ，ＹＵＺｏｎｇｘｉｎｇ，ＣＨＥＮＬｅｉ，ＳＵＮＸｉａｏｙｕｎ１２（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓａｎｄＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｈａｎｇｈａｉＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔ