谷胱甘肽响应的可激活磁共振成像 纳米探针的制备研究论文.docVIP

谷胱甘肽响应的可激活磁共振成像 纳米探针的制备研究毕业论文 目 录 1 绪论 1 1.1研究背景 1 1.2课题的提出 4 1.3论文结构和各章节安排 4 2 材料合成 5 2.1四氧化三铁（Fe3O4）纳米粒子合成 5 2.1.1引言 5 2.1.2实验试剂及器材 5 2.1.3实验步骤 6 2.1.4透射电子显微镜（TEM：Transmission electron microscope）扫描 6 2.1.5 ICP-MS制样 7 2.1.6 MR扫描 7 2.1.7傅里叶变换红外光谱分析 8 2.2 PEG-Gd2O3合成 9 2.2.1引言 9 2.2.2实验试剂及器材 9 2.2.3透析袋前处理 10 2.2.4实验步骤 10 2.2.5 MR扫描 11 2.2.6傅里叶变换红外光谱分析 12 2.3 胱胺合成 13 2.3.1引言 13 2.3.2实验试剂及器材 13 2.3.3实验步骤 14 2.4讨论 14 3 可激活MRI纳米探针Fe3O4-SS-Gd2O3的制备 15 3.1 Fe3O4-SS-Gd2O3的傅里叶变换红外光谱分析 15 3.2不同浓度四氧化三铁（Fe3O4）纳米粒子对MRI信号的影响 15 3.3不同浓度氧化钆（PEG-Gd2O3）对MRI信号的影响 16 3.4谷胱甘肽（GSH）对T1弛豫率的影响 17 3.5不同浓度谷胱甘肽（GSH）的MRI信号响应 18 3.6 讨论 19 4 可激活MRI纳米探针Fe3O4-SS-Gd2O3的MTT测试 20 4.1 实验试剂及器材 20 4.2 NIH 3T3小鼠成纤维细胞培养 21 4.2.1 NIH 3T3小鼠成纤维细胞复苏 21 4.2.2 NIH 3T3小鼠成纤维细胞传代 22 4.2.3 NIH 3T3小鼠成纤维细胞计数 22 4.2.4 NIH 3T3小鼠成纤维细胞冻存 22 4.3 786-0肾癌细胞培养 22 4.3.1 786-0肾癌细胞复苏 23 4.3.2 786-0肾癌细胞传代 23 4.3.3 786-0肾癌细胞计数 23 4.3.4 786-0肾癌细胞冻存 24 4.4 NIH 3T3小鼠成纤维细胞、786-0肾癌细胞种板 24 4.5 MTT测试 25 4.5.1 786-0肾癌细胞形态表征 26 4.5.2 786-0肾癌细胞存活率测定 26 4.6 讨论 27 5 总结与展望 28 5.1总结 28 5.2展望 28 参考文献 30 翻译 33 英文原文 33 中文译文 40 致 谢 45  1 绪论 1.1研究背景 近年来，肿瘤的发生越来越多，且发病年龄越来越年轻化。然而，肿瘤很难在早期得到及时诊断和治疗，因此，恶性肿瘤是一类严重危害人类健康的常见病，多发病，早期特异性诊断可提高患者生存率，改善生活质量[1]。由于传统影像诊断方法主要针对实质性肿瘤，此时患者已经处于临床中晚期，故治疗效果差，预后较差。所以，恶性肿瘤仍然是威胁人类健康与寿命的一大关键因素。因此，在临床上找到一种有效的肿瘤检查方式与诊断方法并进行良恶性判定具有十分重要的意义。可望为疾病的研究和临床“早早期”诊断、治疗提供基因分子水平信息，而在分子影像学成像技术中，靶向性和高亲和性分子探针的制备起着关键作用为了降低Gd3+本身的毒性，人们采取制备钆离子螯合物的方式来提高对比剂的生物相容性。但螯合物的形成会降低对比剂的对比度，因为与水合钆离子的8-9个位点来说，钆离子螯合物中可与水质子交换的配位点的数目只有1-2个。另一方面，绝大多数的钆对比剂的血液循环时间较短，对组织和细胞缺少选择性，难于表面功能化也限制了其进一步应用。同时，钆离子螯合物中的Gd3+一旦去螯合或者与人体中存在的其他离子，如Zn2+等，交换螯合后被释放有可能会带来潜在的毒性。而且有报道指出钆基对比剂会对生物体肾小管造成直接损害，引起肾细胞纤维化[23]。因此，如何开发具有靶向性、高弛豫效率、使用安全的对比剂是MRI研究的重点和主要发展方向之一。由于纳米粒子的特性，更易于进行表面功能化与功能组装，提高其靶向性SPIO：Superparamagnetic Iron Oxide）是近年来迅速发展的一种纳米材料，SPIO颗粒直径40~400m，表面用葡聚糖包裹。由于血液中直径在30~5000nm的颗粒主要经网状内皮系统清除，因而静脉注射后该类对比剂进入肝脏及脾脏的网状内皮细胞(RES：Reticuloendothelial system)，产生短T2效应，在肝脏枯否细胞可摄取对比剂颗粒。由于正常肝脏存在枯否细胞，而肿瘤内一般无或少含无枯否细胞，因此对比剂能增加肿瘤与肝实质间的对比，从而提高肝脏肿瘤的检出率，对鉴别肿瘤是否肝细胞来源也有较大价值。目前有多种网状内皮细胞性MR对比剂已经商品