第十一章 红霉素的生产.pptVIP

第十一章 红霉素的生产 第一节 概述 第二节 生产原理 第三节 红霉素的生产工艺过程 第四节 其他工艺技术及技术改造方向 化学工业出版社 学习目标 了解红霉素的药效作用、应用范围及其它有关工艺技术及技术改造方向； 熟悉红霉素的理化性质、重要化学反应； 掌握红霉素的生产原理、生产工艺过程及生产控制要点。 第一节 概述 认识红霉素 红霉素是大环内酯类抗生素。这类抗生素结构具有聚烯酮衍生的，被一内酯键闭合的大环内酯骨架，并通过羟基以糖苷键联结1～3个罕有的中性或碱性糖。化学结构如下： 红霉素A是白色或类白色的结晶性粉末，微有吸湿性，味苦，易溶于醇类、丙酮、氯仿、酯类（如乙酯、丁酯、戊酯等），微溶于乙醚。在水中的溶解度为2mg/ml（25℃左右），它随着温度的升高而减少。在室温和pH 6～8的条件下，其溶液相当稳定，温度升高稳定性下降。红霉素熔点为135～140℃（游离碱水合物），190～193℃（无水游离碱）。且具有旋光性和紫外吸收峰。红霉素碱能和有机酸或无机酸类结合成盐，其盐类易溶于水。 红霉素是广谱抗生素，对革兰氏阳性菌作用强，临床上主要用于呼吸道感染、皮肤与软组织感染、泌尿生殖系统感染及胃肠道感染等。 第二节 生产原理 红霉素是由红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythrea）发酵产生的。该菌以前称为红霉素链霉菌（Streptomyces erythreus）。生产上一般是将其孢子悬液接入种子罐，种子扩大培养2次后移入发酵罐进行发酵，发酵液经过预处理后，再经溶媒萃取进行分离纯化，最后经浓缩结晶干燥后得成品。 红霉素产生菌的培养 菌体的生长发育 红色糖多孢菌在合成培养基上生长的菌落由淡黄色变为微黄色，气生菌丝为白色，孢子呈不紧密的螺旋形，约3～5圈，孢子呈球状。 菌种的培养 红色糖多孢菌一般经斜面孢子、摇瓶培养、种子罐培养后移入发酵罐进行发酵生产。 红霉素的生物合成 合成机理 红霉素的生源主要来自葡萄糖和氨基酸，其生物合成过程是一个相当复杂的过程，下面是红霉素生物合成的最后几步：①丙酸盐经过多步反应形成中间体6-脱氧红霉内酯B；②在C-6上进行羟基化反应形成红霉内酯B；③L-红霉糖转至内酯环的C-3位羟基上形成3-α-L-碳霉糖基红霉内酯B；④D-红霉氨基糖结构部分转移至C-5羟基后得到红霉素D；⑤红霉素D在C-12羟基化可得红霉素C，红霉素C再甲基化则得红霉素A；⑥红霉素D的红霉糖部分甲基化可形成红霉素B 。 红霉素生物合成过程中红霉素反馈调节生物合成最后一步酶—甲基化酶的活性，而丙酸激酶和丙酰-CoA羧化酶的活化与红霉素合成有关。 发酵 红霉素发酵属于好氧发酵过程，在发酵过程中，需不断通入无菌空气并搅拌，以维持一定的罐压和溶氧。 发酵过程中应严格控制发酵温度、发酵液还原糖量、pH值、溶氧量及发酵液粘度等，以便红色糖多孢菌能够大量合成红霉素并排至胞外。生产中还要加入消泡剂以控制泡沫。 在发酵期间每隔一定时间也要取样进行分析、镜检及无菌试验，检测生产状况，分析或控制相关参数。 发酵液的预处理和过滤 发酵液中除含有约0.8%的红霉素外，绝大部分是菌丝体、蛋白质、色素、油等杂质，给提取和精制带来困难。尤以蛋白质和油等的存在，在溶媒萃取时将产生严重的乳化现象。 一般采用硫酸锌沉淀蛋白质，促使菌丝结团加快滤速。加入去乳化剂（十二烷基苯磺酸钠，DS），由于硫酸锌呈酸性，为了防止红霉素局部酸解而破坏，要用NaOH调节pH值。由于锌离子的毒性给滤渣处理带来一定困难，改用碱式氯化铝有利于处理滤渣。 经过预处理的发酵液便可进行过滤去除菌丝体及沉淀的蛋白质。红霉素发酵液过滤采用板框过滤机。 红霉素的提取 红霉素分子结构中有一个二甲基氨基官能团，是一个弱碱，pKa=8.6，在酸性条件下与某些酸会形成盐，如红霉素乳酸盐。纯红霉素碱在水中溶解度较小，并随温度升高而减小，在55℃时溶解度最小，当pH＞10.0时红霉素基本以游离碱的形式存在，能溶于乙酸丁酯中，当pH＜6.0时，红霉素以盐的形式存在，其在水中的溶解度随pH降低而迅速增大。 提取采用在乙酸丁酯及在水溶液（乙酸缓冲液）中反复萃取。 红霉素的精制 在乙酸丁酯结晶液中加入丙酮，低温下放置使红霉素结晶析出。一般加液操作温度要低。因为红霉素在丙酮溶液中随温度升高溶解度降低，加液温度高结晶会形成块状物，难于过滤。结晶产生后，适当提高温度减少母液中红霉素含量，使结晶完全。结晶经分离并洗涤后可除去红霉素C，提高成品质量，最后