第十一章色谱分析法概论.ppt

色谱分析法概论 第一节 色谱法发展与分类 一、什么是色谱法 色谱分析法简称色谱法(chromatography)，是一种物理或物理化学分离分析方法。 1906年，植物色素分离，色带 图示 固定相——CaCO3颗粒 流动相——石油醚 定义、实质和目的 定义：利用物质的物理化学性质建立的分离、分析方法 实质：分离 目的：定性分析或定量分析 一、色谱法的历史发展 1.新型固定相和检测器的研制 2.色谱新方法的研究 3.色谱联用技术 4.色谱专家系统 二、分类： 1．按两相分子的聚集状态分： 流动相 固定相 类型 续前 2．按操作方式分： 3．按分离机制分： 3．按分离机制分： 定性参数 定量参数 柱效参数 分离参数 相平衡参数 由过程可知，色谱法是利用混合物中各组分在两相中吸附、分配、离子交换、亲和力、分子尺寸等差异，使固定相对各个组分的保留作用不同，当两相做相对运动时，不同组分产生反复多次的差速迁移而进行分离分析的方法。 第三节经典液相色谱法 一、吸附柱色谱法 是根据吸附剂对样品中各组分吸附能力不同，在两相作相对运动时，导致各组分在色谱柱中产生差速迁移，使各组分流出色谱柱的时间不同而分离 1.吸附作用与吸附平衡 吸附剂一般为较大比表面积的多孔性固体颗粒，其表面有许多吸附活性位点。 组分分子、流动相分子与吸附剂表面吸附活性位点之间吸附和洗脱速度相等时即达到吸附平衡。 固定相→吸附剂（硅胶或AL2O3） 具表面活性吸附中心 吸附系数 图示 分离机制： 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离 吸附→解吸→再吸附→再解吸→无数次洗脱→分开 Ka的意义 若Ka值较小，则说明该组分在固定相保留作用较弱，不易被吸附，迁移速度快，先流出柱。 2.吸附等温线 一定温度下，组分在吸附剂表面被吸附达到平衡时，组分在两相中浓度相对关系的曲线，称为吸附等温线（adsorption isotherm） 横坐标为组分在流动相的浓度，纵坐标为在固定相的浓度。 一般分为直线型、凸型和凹型三种 凸形等温线 吸附剂表面有不同吸附力的位点，组分分子优先占据高吸附力位点。在浓度较低时，组分吸附牢靠较难洗脱，高浓度时，吸附在低吸附位点的组分分子吸附较为松散，洗脱快，导致组分在浓度较高区域迁移速度快于浓度较低区域，流出曲线为前缘陡峭，后部托位的不对称峰形。 柱色谱 色谱图 随时间 t 记录色谱流出曲线，即色谱图 I tR Wσ t0 tR′ h W? h/2 0.607h o Wb t 进样 空气 组分1 组分2 （惰性物质） （二）固定相与流动相 1.固定相 （1）基本要求：均匀、坚固颗粒，吸附力强且可逆，不发生化学反应及溶解。 （2）常用吸附剂 硅胶、氧化铝 2.流动相 （1）基本要求：纯度合格、溶解样品、粘度小，性质稳定，可挥发便于回收样品 （2）选择 从试样、吸附剂和流动相三个方面考虑。 相似相溶、混合溶剂、梯度洗脱 （二）分配柱色谱法 流动相→必须与固定相不为互溶 载体→惰性，性质稳定， 不与固定相和流动相发生化学反应 （二）分配色谱法 分配系数 图示 分离机制 利用组分在流动相和固定相间溶解度差别实现分离连续萃取过程。分配系数大越易分离