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实验九 真 菌 目的要求 掌握白假丝酵母菌和新生隐球菌的染色性、菌落特点和鉴定实验。 器材和试剂 菌种：白假丝酵母菌、新生隐球菌 培养基：沙氏培养基、血平板、多细胞真菌 试剂：革兰染液，小牛血清 其他：盖玻片，载玻片，小试管等。 步骤与方法 菌落观察 ： 1.白假丝酵母菌接种于沙氏平板和血平板上，室温培养后菌落为类酵母型，表面光滑湿润，边缘整齐，灰白色或奶酪色。 2.新生隐球菌在沙氏平板和血平板上，室温或35度培养后菌落为酵母型，表面粘稠，混浊，由乳白色渐转为橘黄色、棕色或深棕色。 镜下观察： 1.白假丝酵母菌革兰染色阳性，着色不均。芽生孢子为圆形或椭圆形，有时可伸长成芽管，不与母细胞脱离形成假菌丝。 2. 新生隐球菌革兰染色阳性，菌体圆形或椭圆形，可有圆形芽管。墨汁染色，暗背景下，菌体为圆形或椭圆形，可有圆形芽管，细胞外有一层宽厚的透明荚膜。 步骤与方法 鉴定实验 芽管形成实验：用于区别白假丝酵母菌和热带假丝酵母菌。 操作：将假丝酵母菌接种于0.2-0.5ml的人或动物血清中，35摄氏度1.5-4h，镜下观察有无芽管形成。 结果：白假丝酵母菌为阳性，热带念珠菌阴性。 新生隐球菌 墨汁负染色法 制片：取1滴优质墨汁置于载玻片上与被检材料混合，盖上盖玻片于显微镜下观察。 显微镜检查：新生隐球菌为圆形或卵圆形酵母细胞，有芽生孢子，细胞外有一层胶质样荚膜，一般厚度与菌体相等